[发明专利]一种用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法和应用

权利要求书

1.一种用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，包括以下具体步骤：

S1.在含花青素提取物的培养基中接种微生物培养后，转移微生物培养液至无菌离心管中，离心后弃尽上清，得沉淀为微生物菌体；

S2.加入磷酸盐缓冲液到步骤S1的离心管中，重悬菌体沉淀，制成菌悬液；

S3.花青素提取物用0.2μm微孔滤膜过滤除菌，将已除菌的花青素提取物添加到步骤S2的菌悬液中混合均匀，将菌悬液置于35~37℃静置培养；

S4.将培养后的菌悬液离心后取出上清液，即为微生物催化天然花青素转化原儿茶酸；

其中，所述的微生物为鼠李糖乳杆菌YYJP-2(L.rhamnosus YYJP-2），该菌种于2016年11月21日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC 60115 。

2.根据权利要求1所述的用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，步骤S1中所述的含花青素提取物的培养基的配方为：花青素提取物1~10%、酪蛋白胨或胰蛋白胨或细菌蛋白胨8~12 g/L、牛肉膏8~12 g/L、酵母膏或酵母提取物3~5 g/L、葡萄糖10~20 g/L、吐温80 1.0 g/L、磷酸氢二钾2.0 g/L、乙酸钠5.0 g/L、柠檬酸三铵2.0 g/L、硫酸镁0.2 g/L和硫酸锰0.05 g/L；所述培养基的pH为5.5~6.0，所述微生物培养的时间为18~24h，所述离心的速率为5000~8000rpm。

3.根据权利要求1所述的用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，步骤S2中所述的磷酸盐缓冲液包括磷酸二氢钾8.2~8.4 g/L和磷酸氢二钾0.7~0.9g/L，所述磷酸盐缓冲液的pH为5.5~5.8；所述菌悬液的浓度10⁵CFU/mL。

4.根据权利要求1所述的用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，步骤所S3中所述花青素提取物为新鲜紫薯、紫甘蓝、山竹壳、黑枸杞、桑葚中的花青素原料的提取物。

5.根据权利要求4所述的用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，所述花青素提取物的提取工艺为：配制40~80%乙醇溶液，加入浓HCl调节pH为3~4，再加入花青素原材料，花青素原材料和乙醇溶液的质量比为1：(10~40)，在50~60℃条件下超声波辅助提取30~120min，5000rpm离心10min，收集上清液，在压力0.8~0.9Mpa和温度60℃条件下真空浓缩，即得到花青素提取物。

6.根据权利要求1所述的用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，步骤S3中所述的已除菌的花青素提取物与菌悬液的体积比为1:(10~100)。

7.根据权利要求1所述的用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，步骤S3中所述静置培养的时间为12~48h。

8.根据权利要求1所述的用微生物全细胞催化天然花青素转化原儿茶酸的方法，其特征在于，步骤S4中所述离心的速率为5000~10000rpm，所述离心的时间为10~15min。