[发明专利]准确快速捕获循环肿瘤细胞的方法在审
| 申请号： | 201710214095.0 | 申请日： | 2017-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN107058226A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 薛峰 | 申请（专利权）人： | 云南赫斯提雅生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 云南派特律师事务所53110 | 代理人： | 叶健 |
| 地址： | 650000 云南省昆明市高新区科高路新光巷*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 准确 快速 捕获 循环 肿瘤 细胞 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种准确快速捕获循环肿瘤细胞的方法，其特征在于：筛选出两个高亲合力抗体，两个所述抗体同时结合到CTC标志物两个临近的抗原表位上，分别偶联单链核苷酸；
所述两个抗体结合完成后，加入第三个单链核苷酸，所述第三个单链核苷酸与一个抗体上偶联的单链核苷酸的3’端及另一个抗体上偶联的单链核苷酸的5’端互补，通过退火和连接，两个抗体上的核苷酸连接成一条完整的核苷酸链，与荧光探针进行杂交，利用流式分选仪对标有荧光探针的CTC进行捕获。
2.根据权利要求1所述的准确快速捕获循环肿瘤细胞的方法，其特征在于：两个所述抗体分别偶联单链核苷酸时，核苷酸序列在人基因组中不存在。
3.根据权利要求1所述的准确快速捕获循环肿瘤细胞的方法，其特征在于：所述退火和连接的条件为37℃的条件下温浴1小时。
4.根据权利要求1所述的准确快速捕获循环肿瘤细胞的方法，其特征在于：所述杂交是将荧光探针稀释至100nM，在稀释后的反应溶液中加入鲑鱼精DNA减少非特异结合，将该溶液加入细胞中，混合均匀后置于37℃温浴1小时。
5.根据权利要求1-4任一项所述的准确快速捕获循环肿瘤细胞的方法，其特征在于：两个所述抗体分别为EC1和AC2。
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