[发明专利]一种嵌合强启动子及其用途

权利要求书

1.一种分离的多核苷酸，其包含如下元件：

hCMV增强子、β-Actin启动子和mCMV增强子；

其还包含Ubi增强子，所述Ubi增强子位于上述3种元件的下游；

并且所述多核苷酸依次包含：

mCMV增强子+hCMV增强子+β-Actin启动子+Ubi增强子；

所述多核苷酸具有启动子功能；

其中，

mCMV增强子的核苷酸序列如SEQ ID NO：20所示；

4种元件各自独立地为1个。

2.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中：

hCMV增强子的核苷酸序列如SEQ ID NO：17所示；

β-Actin启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：18所示；

mCMV增强子的核苷酸序列如SEQ ID NO：20所示；

Ubi增强子的核苷酸序列如SEQ ID NO：21所示。

3.根据权利要求1至2中任一项所述的多核苷酸，其各个元件之间有或没有连接序列或者剪接位点。

4.根据权利要求1至2中任一项所述的多核苷酸，其中，在mCMV增强子和/或hCMV增强子和/或Ubi增强子的上游和下游分别有剪接供体和剪接受体。

5.根据权利要求4所述的多核苷酸，其中，所述剪接供体的核苷酸序列如SEQ ID NO：22所示；所述剪接受体的核苷酸序列如SEQ ID NO：23所示。

6.一种核酸构建体，包含权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸，以及可操作地连接的外源基因。

7.根据权利要求6所述的核酸构建体，其中，所述外源基因选自p53、GM-CSF、IL-2、IL-12、IL-24、Trail、p16、TK、IFNγ、TNFα、Rb、Sirpα中的任意一种或多种。

8.根据权利要求6所述的核酸构建体，其中，所述外源基因为SEQ ID NO：12所示p53和/或SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：14所示GM-CSF。

9.一种重组载体，其含有权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸或者权利要求6至8中任一项所述的核酸构建体。

10.根据权利要求9所述的重组载体，其中，所述重组载体为重组病毒载体。

11.根据权利要求9所述的重组载体，其中，所述重组载体为权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸或者权利要求6至8中任一项所述的核酸构建体与pDC315质粒或SG655经重组得到的重组载体。

12.一种药用组合物，其包含权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸或者权利要求6至8中任一项所述的核酸构建体或者权利要求9至11中任一项所述的重组载体，以及可选的药学上可接受的辅料。

13.选自如下的(1)或(2)的用途：

(1)权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸或者权利要求6至8中任一项所述的核酸构建体或者权利要求9至11中任一项所述的重组载体在制备治疗和/或预防癌症或者抗肿瘤的药物中的用途；

(2)权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸或者权利要求6至8中任一项所述的核酸构建体或者权利要求9至11中任一项所述的重组载体在制备抑制肿瘤细胞的药物或者试剂中的用途。

14.根据权利要求13所述的用途，其中，第(1)项中，所述癌症或者肿瘤为肺癌、肝细胞癌、淋巴瘤、结肠癌、大肠癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、胃癌、胆管癌、胆囊癌、食管癌、肾癌、神经胶质瘤、黑色素瘤、胰腺癌或前列腺癌。