[发明专利]诱导脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的方法有效
| 申请号： | 201710218934.6 | 申请日： | 2017-04-05 |
| 公开（公告）号： | CN106834223B | 公开（公告）日： | 2020-03-27 |
| 发明（设计）人： | 颜学恒;薛宜青;熊延狮;张智培;苏恩筠 | 申请（专利权）人： | 上海逍鹏生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 上海远同律师事务所 31307 | 代理人： | 张坚 |
| 地址： | 201108 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 诱导 脐带 间充质 干细胞 软骨 细胞 分化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种诱导脐带间充质干细胞向软骨细胞分化的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
步骤1)接种：经分散成单个细胞的脐带来源的间充质干细胞悬浮于DMEM高糖培养基中形成细胞溶液，再将所述细胞溶液以250个/μL～2500个/μL的细胞浓度，滴在培养板上；步骤1)中，所述培养板为96孔板，将所述细胞溶液以100μL的体积滴在所述96孔板中；
步骤2)悬滴培养：将所述培养板倒置进行悬滴培养24h～48h，获得成簇种子细胞团；
步骤3)加入分化培养基进行悬滴培养：吸除所述培养板上的DMEM高糖培养基，加入软骨分化培养基，继续倒置所述培养板进行悬滴培养获得软骨细胞团。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述步骤2)中悬滴培养的条件为37℃，5％CO2以及饱和湿度。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述步骤3)中加入分化培养基后悬滴培养的条件为37℃，5％CO2以及饱和湿度；每2天更换分化培养基，培养总时长为15天。
4.如权利要求1至3中任意一项所述的方法，其特征在于：
步骤3)中所采用的软骨分化培养基为无血清的软骨分化培养基。
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