[发明专利]丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于高分子材料技术领域，具体涉及一种丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯及其制备方法。

背景技术

羧甲基壳聚糖硫酸酯是对羧甲基壳聚糖的羟基进行磺化改性后得到的产物，其骨架上分布有许多自由羟基、羧基钠和氨基基团，是理想的化学改性物质，与羧甲基壳聚糖相比，羧甲基壳聚糖硫酸酯不仅保留了羧甲基壳聚糖良好的水溶性、无毒性、生物相容性等性能，同时还具有良好的抗凝血性、自由基清除及抗癌活性，这些优良的性质使其在医药等行业具有很好的应用价值。但羧甲基壳聚糖硫酸酯生物相容性并不十分理想，需要对其进一步改性。

丝素肽是丝素蛋白的水解产物，具有良好的生物性能，被广泛应用于生物医药领域。丝素肽极易被皮肤吸收，具有良好的透氧、吸湿保湿、抗氧化性能，能促进细胞的黏附与生长，是修复组织损伤的重要原料。相关研究者采用丝素肽对羧甲基壳聚糖硫酸酯进行复合改性，期望能够获得综合二者优点的产品。目前一般采用的方法将多肽与多糖进行混合或化学交联，但混合改性产物稳定性低，而传统的化学交联虽然稳定性好，但交联剂的引入可能引起副反应和毒性作用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的上述不足，提供一种丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯及其制备方法。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是：

提供一种丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯，它由以下方法制备得到：

1)分别配制浓度为0.15-0.2mol/L的磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液，然后将磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液混合均匀配制得到pH为5.5-6.0的磷酸盐缓冲溶液；

2)将羧甲基壳聚糖硫酸酯溶于步骤1)所得磷酸盐缓冲溶液中，得到浓度为0.015-0.02g/mL的羧甲基壳聚糖硫酸酯溶液；

3)将丝素肽溶于步骤1)所得磷酸盐缓冲溶液中，得到浓度为0.012-0.028g/mL的丝素肽溶液；

4)将转谷氨酰胺酶溶于步骤1)所得磷酸盐缓冲溶液中，得到浓度为0.0015-0.002g/mL的转谷氨酰胺酶溶液；

5)向步骤2)所得羧甲基壳聚糖硫酸酯溶液中依次加入步骤3)所得丝素肽溶液和步骤4)所得转谷氨酰胺酶溶液，其中羧甲基壳聚糖硫酸酯、丝素肽、转谷氨酰胺酶的质量比为1.0：0.6-1.4：0.1，并在25-65℃下搅拌3-11小时，随后将所得反应液后处理得到丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯。

按上述方案，步骤5)所述后处理包括将反应液升温至95℃反应10min，然后进行抽滤、透析纯化、冷冻干燥。

按上述方案，所述丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯中丝素肽的质量含量为22.8-45.0％。

本发明还提供上述丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯的制备方法，其步骤如下：

1)分别配制浓度为0.15-0.2mol/L的磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液，然后将磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液混合均匀配制得到pH为5.5-6.0的磷酸盐缓冲溶液；

2)将羧甲基壳聚糖硫酸酯溶于步骤1)所得磷酸盐缓冲溶液中，得到浓度为0.015-0.02g/mL的羧甲基壳聚糖硫酸酯溶液；

3)将丝素肽溶于步骤1)所得磷酸盐缓冲溶液中，得到浓度为0.012-0.028g/mL的丝素肽溶液；

4)将转谷氨酰胺酶溶于步骤1)所得磷酸盐缓冲溶液中，得到浓度为0.0015-0.002g/mL的转谷氨酰胺酶溶液；

5)向步骤2)所得羧甲基壳聚糖硫酸酯溶液中依次加入步骤3)所得丝素肽溶液和步骤4)所得转谷氨酰胺酶溶液，其中羧甲基壳聚糖硫酸酯、丝素肽、转谷氨酰胺酶的质量比为1.0：0.6-1.4：0.1，并在25-65℃下搅拌3-11小时，随后将所得反应液后处理得到丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯。

本发明还包括上述丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯在医药方面的应用。以及该丝素肽接枝羧甲基壳聚糖硫酸酯在化妆品领域的应用。

本发明以转谷氨酰胺酶为催化剂，催化丝素肽和羧甲基壳聚糖硫酸酯合成以酰胺键连接的丝素肽-羧甲基壳聚糖硫酸酯改性物，反应条件温和，制备得到的改性物具有较好的水溶性、吸湿保湿及抗氧化活性。