[发明专利]凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗帕金森病制剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗帕金森病制剂中的应用，具体是用凝结芽孢杆菌预防或治疗帕金森病，减少帕金森病症状。

背景技术

帕金森病(PD)，即震颤麻痹，是目前中老年人中常见的中枢神经系统变性疾病，也是仅次于阿尔茨海默病的第二常见神经退行性疾病。帕金森病临床以静止性震颤、肌强直、运动迟缓、姿势步态异常为主症，多伴有自主神经功能受累、认知功能下降等表现。该病起病缓慢，逐渐发展，初始症状往往不被人们所注意，后期多发生严重的肌强直伴全身僵硬，最终导致卧床不起，严重影响患者生活质量并缩短生存寿命。现我国帕金森病患者人数约200万，预估每年我国新发病人数超过10万。我国已逐渐步入老龄化社会，老年人数目急剧增加，该病发病率随之上升。

帕金森病目前的治疗措施主要为药物治疗。目前西药治疗主要使用左旋多巴类制剂，被誉为PD药物治疗的“金标准”，但在服药2～5年后出现疗效减退、症状波动、以多动为特性的并发症。随着患者接受西药疗法时间的延长，其症状逐渐难以控制，甚至加重病情。中医的不足之处在于凭经验用药、无固定方剂及用量，且患者个体差异大，医者临床经验参差不齐，药材来源各异，使用局限，故难以产生很好的临床效果。

本发明人经过研究发现，凝结芽孢杆菌能够有效预防或治疗帕金森病，安全没有任何毒副作用，效果优于双歧杆菌，且未见相关研究报道，特申请此发明专利。

发明内容

本发明的目的是提供一种能预防或治疗帕金森病的制剂，该制剂由凝结芽孢杆菌制成。

本发明的制剂的制备优选是通过下述步骤实施的，但不局限于此制备工艺，公知的能实现的制备工艺均可以：采取可能含凝结芽孢杆菌的样品，然后将样品置于灭菌瓶内，研究时从中取一定量的样品加入18mL灭菌的稀释液中，充分混匀，在无菌操作台内，进行10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7梯度稀释，取10^-5、10^-6、10^-7三个稀释梯度，分别涂布于凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基上，置于培养箱，37℃下培养48小时，选择长势良好的单菌落分别接种于液体扩增培养基中，置于培养箱内，37℃下扩增培养48小时。将所得培养液离心(12000rpm)分离出菌体后，将菌体冷冻真空干燥，调制出干燥菌粉，然后根据《伯杰细菌鉴定手册》、相关细菌鉴定文献或16S rRNA序列对比分析进行凝结芽孢杆菌鉴定和毒性试验，将无毒性的凝结芽孢杆菌干燥菌粉按需要比例添加辅料制成片剂、胶囊、散剂、粉剂或液体制剂等各种剂型，也可加入其他活菌或低聚果糖等低聚糖起到协同作用。

凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基优选但不局限于：纯化水1000mL，蛋白胨10g，牛肉浸取物10g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，酵母粉5g，葡萄糖5g，磷酸二氢钾2g，吐温801.0ml，碳酸钙20g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，琼脂15g，调pH 6.2-6.5，115℃高压灭菌20min。

凝结芽孢杆菌液体扩增培养基优选但不局限于：纯化水1000mL，蛋白胨10g，牛肉浸取物3g，氯化钠5g，葡萄糖5g，调pH 7，115℃高压灭菌20min。

为进一步具体说明本发明，发明人利用上述方法通过凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基分离鉴定出了无毒性的凝结芽孢杆菌，本发明所述凝结芽孢杆菌并不局限于为说明本发明所述的菌，只要无毒性的凝结芽孢杆菌均是本发明所述，均在本发明的保护范围内。

本发明所述凝结芽孢杆菌优选但不限于凝结芽孢杆菌TBC169保藏编号CGMCC1207或凝结芽孢杆菌保藏编号CGMCC1.2407。

本发明实施说明中优选使用的凝结芽孢杆菌的细菌学性质：

1、为说明本发明，本发明利用上述方法分离的凝结芽孢杆菌为凝结芽孢杆菌TBC169保藏编号CGMCC1207。

2、菌落形态

显微镜观察：杆状，革兰氏染色阳性。

平板形态：菌落呈白色、圆形、边缘整齐、大小2-3mm。

3、生理生化鉴定

明胶液化：－；过氧化氢酶：+；VP试验：+；苯丙氨酸脱氨酶试验－。

4、糖酵解实验鉴定

葡萄糖：+；麦芽糖：+；蔗糖：+；木糖：－；果糖：+；鼠李糖：－；乳糖：+；菊粉：+；半乳糖：+；糊精：+。