[发明专利]一种高脂血症模型的造模方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，具体是一种高脂血症模型的造模方法。

背景技术

高脂血症是动脉粥样硬化、心脏病、中风和脂肪肝等疾病的主要诱发因素之一，严重威胁着人们的健康。为探究高脂血症防治方法，建立良好的高脂血症实验动物模型是必不可少的。实验动物模型在科学实验和药物研发中占有重要地位，造模成功与否直接影响整个实验的准确性和代表性。但由于实验指标、实验条件和实验经费等因素的制约，在选择动物模型时就要对不同动物以及不同的造模方法进行取舍，根据实验目的找到最合适的动物模型。在高脂血症模型中，大鼠、小鼠应用比较广泛，但是其血浆中运输胆固醇的主要载体是高密度脂蛋白胆固醇，而人类血浆运输胆固醇的主要载体是低密度脂蛋白胆固醇；而豚鼠、金黄地鼠、长爪沙鼠虽然在实验应用方面相对较少，但其脂类代谢方式与人类更为相似。

现有的高脂血症造模方法主要有单纯高脂乳剂灌胃法，高脂、高糖、高蛋白乳剂灌胃法，高糖饮食造模法，进食后给予高脂高糖饲料造模法，这些方法主要集中在肝内脂肪酸的合成、氧化与输出的不平衡方面。此外，应用药物或毒物诱导模型等方法，对动物的刺激较大，动物处于应激状态，影响试验结果，且此法不是正常高脂血症发生的常见原因，与人类高脂血症的病理生理特点相差甚远。理想的造模方法，应该具有造模方法简单，与人体发病机理相近，可重复率高等特点。

发明内容

本发明的一种高脂血症模型的造模方法，应用改良的高脂饲料饲喂法，符合自然高脂血症发病的情况，以期达到造模效果确实、模型稳定、可重复性强和研究人高脂血症提供合适的模型的目的。

本发明的一种高脂血症模型的造模方法，包括以下步骤：

步骤一，取体重相近、胎次一致的幼犬，公母随机，自由饮水进食，正常饲喂1周后，饲喂高脂日粮造模，每日两次喂食；

所述高脂日粮包括：74％基础饲料、10％猪油、5％蔗糖、5％成人奶粉、5％蛋黄粉和1％胆固醇；

步骤二，在造模第7、14、21、28、35、42、49、56、63、70、77和84天，分别称重，观察犬的体重变化；

步骤三，在造模第7、14、21、28、35、42、49、56、63、70、77和84天，每只犬分别采集血清，测量血清TG、TC、高密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量；采集全血，测量血液流变学指标；

于造模第84天，抽取每只犬抗凝血，测量血液流变学指标；并随机选取三只犬，进行宰杀，取肝脏组织，进行组织病理学超微结构观察，测量指标全部满足TC≥7.8mmol/L，TG显著高于正常组，血液流变学指标出现变化，血液粘稠，肝脏中有较多的脂滴蓄积，确定为高脂血症模型。

优选的，饲喂高脂日粮造模，每日两次喂食，每只犬日摄入高脂日粮的最初量为100g，每日递增5g。

本发明的优点在于：

本试验造模出来的实验犬在血液常规指标的基础上，通过电镜等微观指标检测高脂模型成功后，实验犬的变化，更加准确。

本发明中的方法具有造模方法简单，与人体发病机理相近，可重复率高等特点，这些方面主要基于犬的生理与人的生理的相近性，以及病理的相似性。

具体实施例

以下结合具体实施例对本发明作进一步说明：

实施案例1

配制高脂日粮，按以下百分比配制：74％基础饲料、10％猪油、5％蔗糖、5％成年奶粉、5％蛋黄粉和1％胆固醇，混匀，待用；

取体重相近、胎次一致的幼犬40只，公母随机，自由饮水进食，饲喂于18～22℃明暗各12h的动物实验室内，正常饲喂1周后，随机分为2组，其中30只饲喂高脂日粮造模，另外10只饲喂正常日粮，每日两次喂食。

为了更好的达到造模效果，饲喂高脂日粮造模，每日两次喂食，每只犬日摄入高脂日粮的最初量为100g，每日递增5g。

在造模第7、14、21、28、35、42、49、56、63、70、77和84天，分别称重，观察犬的体重变化；并从每只犬的前肢静脉采血，取血清，测量TG、TC、LDL-C和高HDL-C含量；测量血液流变学指标；

于造模第84天，抽取每只犬抗凝血，测量血液流变学指标；并随机选取三只犬，进行宰杀，取肝脏组织，进行组织病理学超微结构观察，测量指标全部满足TG≥1.68mmol/L、TG显著高于正常组，血液流变学指标出现变化，血液粘稠，肝脏中有较多的脂滴蓄积，确定为高脂血症模型。

造模组和正常组饲喂的时间、次数和摄入量均相同，也根据科学饲养方法的数据来进行造模实验。

实施案例2