[发明专利]一种定量分析水产品中多环芳烃的GC‑MS分析方法

权利要求书

1.一种定量分析水产品多环芳烃气相色谱与质谱联用的方法，其特征在于步骤如下：

样品前处理：生物体在室温下解冻，去掉鱼鳞和鱼皮，用纯净水充分洗涤以除去可能的杂质，取其背部肌肉作为分析对象，然后将样品进行冷冻干燥；将冷冻干燥过的样品研磨成粉末、称重，然后用抽提过的滤纸包裹，放在干燥皿中于冰箱中冷藏备用。

2.索氏提取：首先分别使用丙酮、二氯甲烷、正己烷三种有机溶剂淋洗抽提器皿；称取一定量的样品（5g），加入回收率指示物（NaP-d₈、 ACE-d₁₀、PHEN-d₁₀、CHRY-d₁₂和 PERY-d₁₂），然后用200mL正己烷/丙酮(1:1，v:v)索氏抽提48小时。

3.优选地，所述抽提器皿的市售的索氏提取器；或者优选地，所述抽提器皿是本领域常规的圆底烧瓶连接冷凝器、抽提器组成的抽提器皿。

4.有机溶剂转换：索氏提取后含有目标物的有机溶液在旋转蒸发仪上进行旋转蒸发，直至体积为2mL左右，然后将其转移至5mL离心管内，正己烷定容，分出1mL浓缩液用于测定样品的脂肪含量，其余4mL准备进行凝胶色谱柱净化。

5.凝胶渗透色谱柱净化（GPC）：首先使用60mL二氯甲烷和正己烷的混合溶液(1:1，v:v)淋洗GPC色谱柱，淋洗完后缓慢加入有机溶液样品，然后用280mL溶剂淋洗，弃去前面110mL淋洗液，用圆底烧瓶收集110-280mL含有目标物的组分，通过凝胶色谱柱以除去其中的脂肪和大分子蛋白质等组分。

6.氧化铝-硅胶复合层析柱净化：将收集的淋洗液浓缩为2mL，转移至硅胶氧化铝柱，用100ml正己烷/二氯甲烷(1:1，v:v)淋洗，用鸡心瓶收集15-100mL含有目标物的组分。

7.氮吹定容：所得淋洗液再次旋转蒸发浓缩并小心地转移至2.0mL的细胞瓶中，氮吹定容为1mL，加入内标化合物，最后等待气相色谱与质谱联用定量分析。

8.仪器分析的色谱条件：采用气相色谱-质谱联用仪（HP6890/GC5973, MSD），选择离子监测模式（SIM）进行PAHs的分析测定，色谱柱为DB-17石英毛细管柱（60m×0.53mm×1.0um），程序升温条件为：初始温度60℃，保留3 min，然后以10℃/min的速度升至180℃，再以5℃/min的速度升至285℃，保留12 min，以恒压为10.0 psi的高纯氦气（99.999%）为载气，采用无分流进样，进样量为1uL，电子能量为70eV，进样口温度为300℃，离子源为250℃。

9.根据权利要求1所述的一种定量分析水产品多环芳烃气相色谱与质谱联用的方法，其特征在于：权利要求5中凝胶渗透色谱柱为：准确称取40g SX-3 “Bio-Beads”(Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA)置入平底烧瓶中，用1:l (v:v)正己烷和二氯甲烷的混合溶剂浸泡24，用玻璃滴管慢慢将“Bio-Beads”转移至色谱柱中(内径为25mm，长度为40cm)，柱子装完后先用一定量1:1(v:v)的正己烷/二氯甲烷冲洗，放置一段时间待稳定后再使用。

10.根据权利要求1所述的一种定量分析水产品多环芳烃气相色谱与质谱联用的方法，其特征在于：权利要求6中氧化铝-硅胶复合层析柱为：采用正己烷湿法装柱，柱内径为10mm，长度为30cm，由下而上分别： 1cm脱脂棉，6cm氧化铝，12cm中性硅胶，2cm无水硫酸钠。