[发明专利]一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片及其应用有效
申请号: | 201710228226.0 | 申请日: | 2017-04-10 |
公开(公告)号: | CN107012067B | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 杨朝勇;张明霞;邹远;朱志 | 申请(专利权)人: | 杭州微著生物科技有限公司 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;B01L3/00;C12N5/09 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 张松亭;游学明 |
地址: | 310000 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 单颗粒 捕获 连接通道 配对 高通量 微流控芯片 捕获层 控制层 流道 隔离 芯片 单细胞捕获 单细胞分析 捕获单元 隔离通道 核酸扩增 配对单元 配对效率 细胞样本 由上到下 隔离泵 操控 裂解 载片 隔膜 连通 平行 应用 并行 垂直 | ||
1.一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片,其特征在于:该微流控芯片包括捕获层、控制层、载片三部分;捕获层包括两个并行的流道(10,11)和连接通道(13),控制层包括隔离通道(12);其中每个捕获通道由多个捕获单元(8,9)首尾串接而成,每个单元包括流道(10,11)、储液腔室(14,15)、捕获通道(16,17)三部分,流道(10,11)包括U形管,前一单元U形管的左臂端连接后一单元U形管的右臂端,储液腔室(14)位于U形的两臂之间,且设有三条通道,第一通道直径大于待捕获的单微球/单细胞,通往U形管的液体进口端,第二通道为捕获通道,直径小于捕获的单微球/单细胞,通往U型管的液体出口端;第三通道为连接通道(13),直径小于捕获的单微球/单细胞,通往并行的另一捕获单元的储液腔室;
连接通道(13)连接两个捕获单元的储液腔室(14,15);隔离通道(12)层位于连接通道(13)下方或上方,垂直于连接通道(13)并由隔膜(18)隔离开;两个流道分别含有一个样品入口(1,2)、一个油相入口(4,5)以及一个出口(6,7),隔离通道含有一个入口(3)。
2.根据权利要求1所述的一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片,其特征在于,所述的捕获通道的宽度为5-500微米,深度为5-500微米;连接通道的宽度为3-100微米,深度为3-100微米。
3.根据权利要求2所述的一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片,其特征在于:所述的颗粒/细胞的直径在5-200μm。
4.根据权利要求1所述的一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片,其特征在于:所用捕获层和控制层的材料为聚二甲基硅氧烷PDMS,载片材料为玻璃,捕获层和控制层通过热校准可逆键合在一起,之后再与玻片通过等离子体键合;或所用捕获层和载片的材料是硅片、玻璃、聚甲基丙烯酸甲酯、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯和聚酯中的一种,控制层的材料是聚甲基丙烯酸甲酯、聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯和聚酯中的一种。
5.根据权利要求1所述的一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片,其特征在于:颗粒通入的流速为0.005mL/h-10mL/h。
6.根据权利要求1所述的一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片,其特征在于:隔离通道所充物质为水溶液、油或者空气,采用控制注射泵的压力,控制隔离通道的压力。
7.一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片,其特征在于:该微流控芯片包括捕获层、控制层、载片三部分;捕获层包括两个并行的流道(10,11)和连接通道(13),控制层包括隔离通道(12);其中每个捕获通道由多个捕获单元(8,9)首尾串接而成,每个单元包括流道(10,11)、储液腔室(14,15)、捕获通道(16,17)三部分,流道(10,11)包括U形管,前一单元U形管的左臂端连接后一单元U形管的右臂端,储液腔室(14)位于U形的两臂之间,且设有三条通道,第一通道直径大于待捕获的单微球/单细胞,通往U形管的液体进口端,第二通道为捕获通道,直径小于捕获的单微球/单细胞,通往U型管的液体出口端;第三通道为连接通道(13),直径小于捕获的单微球/单细胞,通往并行的另一捕获单元的储液腔室;
连接通道(13)连接两个捕获单元的储液腔室(14,15);隔离通道(12)层位于连接通道(13)下方或上方,垂直于连接通道(13)并由隔膜(18)隔离开;两个流道分别含有一个样品入口(1,2)、一个油相入口(4,5)以及一个出口(6,7),隔离通道含有一个入口(3);
还包括用于改变两个捕获单元的储液腔室(14,15)体积的驱动泵。
8.根据权利要求7所述的一种高通量配对捕获单细胞/单颗粒的微流控芯片,其特征在于:改变两个捕获单元的储液腔室(14,15)体积的驱动泵分别位于储液腔室底部,驱动泵和储液腔室之间为隔膜隔开。
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