[发明专利]基因组编辑系统和方法

权利要求书

1.一种用于对细胞基因组中的靶序列进行定点修饰的基因组编辑系统，其包含以下i)至v)中至少一项：

i)Cpf1蛋白，和向导RNA；

ii)包含编码Cpf1蛋白的核苷酸序列的表达构建体，和向导RNA；

iii)Cpf1蛋白，和包含编码向导RNA的核苷酸序列的表达构建体；

iv)包含编码Cpf1蛋白的核苷酸序列的表达构建体，和包含编码向导RNA的核苷酸序列的表达构建体；

v)包含编码Cpf1蛋白的核苷酸序列和编码向导RNA的核苷酸序列的表达构建体；

其中所述Cpf1蛋白的氨基酸序列是SEQ ID NO:4，所述向导RNA能够将所述Cpf1蛋白靶向所述细胞基因组中的靶序列。

2.权利要求1的系统，其中所述编码Cpf1蛋白的核苷酸序列针对待进行定点修饰的细胞所来自的生物体进行密码子优化。

3.权利要求1的系统，其中所述编码Cpf1蛋白的核苷酸序列选自SEQ ID NO:16。

4.权利要求1的系统，其中所述向导RNA是crRNA。

5.权利要求1的系统，所述靶序列具有以下结构：5’-TYYN-N_X-3’或5’-YYN-N_X-3’，其中N独立地选自A、G、C和T；Y选自C和T；X为15≤X≤35的整数；Nx表示x个连续的核苷酸。

6.一种对细胞基因组中的靶序列进行定点修饰的方法，包括将权利要求1-5中任一项的系统导入细胞中，由此所述向导RNA将所述Cpf1蛋白靶向所述细胞基因组中的靶序列，导致所述靶序列中的一或多个核苷酸取代、缺失和/或添加，其中所述细胞是分离的细胞或所述细胞来自植物。

7.权利要求6的方法，其中所述细胞来自哺乳动物、家禽或植物。

8.权利要求7的方法，其中所述哺乳动物选自人、小鼠、大鼠、猴、犬、猪、羊、牛、猫；所述家禽选自鸡、鸭、鹅；所述植物选自水稻、玉米、小麦、高粱、大麦、大豆、花生、拟南芥。

9.权利要求6-8中任一项的方法，其中所述系统通过选自以下的方法导入所述细胞：磷酸钙转染、原生质融合、电穿孔、脂质体转染、微注射、病毒感染、基因枪法、PEG介导的原生质体转化、土壤农杆菌介导的转化。

10.权利要求1-5中任一项的基因组编辑系统在制备用于治疗有需要的对象中的疾病的药物组合物中的用途，其中所述基因组编辑系统用于修饰所述对象中与所述疾病相关的基因。

11.一种用于治疗有需要的对象中的疾病的药物组合物，其包含权利要求1-5中任一项的基因组编辑系统和药学可接受的载体，其中所述基因组编辑系统用于修饰所述对象中与所述疾病相关的基因。

12.权利要求10或11的用途或药物组合物，其中所述对象是哺乳动物。

13.权利要求12的用途或药物组合物，其中所述对象是人。

14.权利要求13的用途或药物组合物，其中所述疾病选自肿瘤、炎症、帕金森病、心血管疾病、阿尔茨海默病、自闭症、药物成瘾、年龄相关性黄斑变性、精神分裂症和遗传性疾病。