[发明专利]一种利用微量元素和稀土元素含量测定结合多元统计分析对丹参进行产地溯源的方法

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种利用微量元素和稀土元素含量测定结合多元统计分析对丹参进行产地溯源的方法。

背景技术

道地药材是特定自然条件、生态环境的地域内所产的名优正品药材，是中医临床长期、反复实践中产生和公认的优质中药材。近年来随着中药需求的提高，道地药材的异地种植现象普遍，造成中药质量下降明显。中药的产地溯源对维护我国中药材市场秩序、保证药材质量和临床安全合理用药具有重要意义。准确高效的药材产地溯源方法是实现中药产地溯源的保障。

近年来，研究者们对中药的产地溯源方法进行了大量探索，发展了多种方法，如：DNA鉴定技术、中药指纹图谱技术、同位素示踪技术等。微量元素特别是稀土元素在自然界中含量小、性质稳定。近年来，基于微量元素和稀土元素特征指纹结合化学计量学的判别分析技术已在食品产地判别中起到了越来越重要的作用，但在中药的产地判别研究中仅有较少应用。现有的化学计量学分析方法包括LDA法、主成分分析法、系统聚类法、聚类分析、SIMCA、DPLC、SVM、PUK以及理化参数分析方法等多种方法，化学成分检测方法包括RFID、HPLC、IRMS、ICP-MS、NIR、GCxGC-TOF/MS等方法。不同种类中药含有的同位素、矿物元素、化学成分等特征性指标存在较大差别。而且，综合考虑中药的生长环境、药用部位、化学成分等的差异，往往需要根据不同种类中药的特点采用不同的方法进行产地溯源。如，人参的分析方法为NIR结合系统聚类法，黄连的分析方法为NIR结合主成分分析，白芷的分析方法为HPLC-DAD结合模式识别，藏红花的分析方法为UV-Vis、HPLC、GC和同位素分析技术结合多元数据分析，川穹的分析方法为GCxGC-TOF/MS结合聚类分析等。

丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)，别名紫丹参、血参、红根等，为唇形科植物，以根入药。主产四川、山东、河南、山西、河北、安徽等省，现全国大部分地区有分布。具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功效，临床上用于心脑血管、癌症、中风、肝炎等疾病的治疗及抗衰老养生保健作用。丹参药用部位为根部，其对土壤中的微量元素和稀土元素有一定的富集效果，所以，不同产地丹参中微量元素和稀土元素的含量差异较小，难以直接利用微量元素和稀土元素含量对丹参进行产地溯源。

发明内容

针对上述现有技术中存在的技术问题，本发明提供了一种利用微量元素和稀土元素含量测定结合多元统计分析对丹参进行产地溯源的方法。

为了解决以上技术问题，本发明的技术方案为：

一种利用微量元素和稀土元素含量测定结合多元统计分析对丹参进行产地溯源的方法，包括如下步骤：

1)采用ICP-MS对不同浓度微量元素和稀土元素混合标准溶液进行分析，制备标准曲线；

2)消解样品，用ICP-MS检测方法对不同产地的多批次丹参样品进行分析，获得其所含微量元素和稀土元素的含量，采用单因素方差分析方法对所有样品的微量元素和稀土元素元素进行差异性分析，当p<0.05时，认为不同产区的元素数据有明显差异；

3)选取具有明显差异的微量元素和稀土元素进行主成分分析，用于数据降维分析；

4)以方差分析选出具有显著性差异的元素作为变量进行线性判别分析，在其中选择7种元素作为判别指标，采用逐步判别法建立判别模型，基于Wilks'lambda values构建了三个判别函数，判别函数F1、F2和F3特征值分别为4.394、1.209和0.396；

5)采用三个判别函数得分绘图对不同省份丹参样品进行检查，对不同产区的丹参样品进行评估区分；

6)采用步骤4)中选取的7种元素作为判别指标，采用正交验证法对判别模型进行验证，确定判别方程的稳定性。

进一步的，步骤1)中，所述标准溶液包括用质量分数为5％的硝酸稀释Agilent稀土多元素混合标准溶液Part#G8500-6955，配制Sc、Y、La、Ce、Pr、Nd、Sm、Eu、Gd、Tb、Dy、Ho、Er、Tm、Yb、Lu的不同浓度的混合标准溶液；

和，用质量分数为5％的硝酸稀释Agilent多元素混标Part#5183-4688配制Na、Mg、K、Ca、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Se、Mo、Cd、Pb、Th、U的不同浓度的标准溶液。

更进一步的，所述混合标准溶液中的稀土元素浓度分别为0.1μg/L，0.5μg/L，1μg/L，2μg/L，5μg/L和10μg/L；