[发明专利]一种具有Cu2+识别功能的双光子荧光探针及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种具有Cu²⁺识别功能的双光子荧光探针，其特征在于其结构式为：

2.一种权利要求1所述的具有Cu²⁺识别功能的双光子荧光探针的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)化合物Ⅰ的合成

将50.00g二乙醇胺溶解在80mL DMSO中，加入20mL对氟硝基苯，140℃反应3.5h；待反应液冷却至室温后，倒入水中，有黄色固体粉末析出，常温下搅拌后抽滤，水洗，真空干燥8-12h，得黄色粉末Ⅰ，即为化合物Ⅰ；

(2)化合物Ⅱ的合成

将5.00g化合物Ⅰ溶解在30mL乙腈中，在冰盐浴条件下逐滴滴加2mL PBr₃，然后加热回流6h；待反应液冷却至室温后倒入冰水中，用饱和Na₂CO₃溶液调至中性，有黄色固体粉末析出，抽滤，用乙醇重结晶，真空干燥8-12h，得淡黄色棒状晶体，即为化合物Ⅱ；

(3)化合物Ⅲ的合成

将4.00g化合物Ⅱ溶解在20mL THF中，加入40mL 40％的三甲胺水溶液，用100mL高压反应釜在90℃反应12h；减压除去有机溶剂，冷却至室温后，缓慢滴加含有8.00g六氟磷酸铵的水溶液，有橘黄色固体析出，抽滤，真空干燥24h，得化合物Ⅲ；

(4)化合物Ⅳ的合成

将2.00g化合物Ⅲ用20mL甲醇溶解在50mL的史莱克烧瓶中，依次加入0.10g 5％Pd/C和1mL水合肼，在氮气保护下回流反应12h；趁热滤除Pd/C，减压除去溶剂，将粗产物用无水乙醇加热洗涤，趁热抽滤得白色固体，即为化合物Ⅳ；

(5)目标产物HL的合成

将0.50g 4-N N’-二羟乙基水杨醛加热溶解在15mL乙醇中，滴加2滴冰醋酸，搅拌5min后加入1.00g化合物Ⅳ，回流反应12h后有黄色固体析出，趁热抽滤，用乙腈和乙醇重结晶得黄褐色针状晶体1.02g，即得目标产物。

3.一种权利要求1所述的具有Cu²⁺识别功能的双光子荧光探针的用途，其特征在于：所述双光子荧光探针在制备生物体内Cu²⁺识别荧光探针中的应用。

4.一种权利要求1所述的具有Cu²⁺识别功能的双光子荧光探针的应用，其特征在于：所述双光子荧光探针能够可逆性地识别细胞内外源性铜离子，在识别细胞内铜离子后荧光淬灭，并且在组氨酸的作用下实现双光子荧光探针的荧光恢复；所述应用为非治疗和/或诊断目的。