[发明专利]大肠杆菌表达的rhFGF7蛋白及应用在审
| 申请号： | 201710233150.0 | 申请日： | 2017-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN107383182A | 公开（公告）日： | 2017-11-24 |
| 发明（设计）人： | 姜潮;刘敏;楚生辉;田海山;陈志裕 | 申请（专利权）人： | 温州医科大学;李校堃 |
| 主分类号： | C07K14/50 | 分类号： | C07K14/50;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;A61K38/18;A61P1/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 长春市东师专利事务所22202 | 代理人： | 张铁生 |
| 地址： | 325035 浙江省温州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 表达 rhfgf7 蛋白 应用 | ||
1.重组的成纤维细胞生长因子Halo-rhFGF7基因，其特征在于，它的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。
2. 重组的成纤维细胞生长因子Halo-rhFGF7蛋白，其特征在于，它是碱基序列如SEQ ID NO.1所示的基因表达的蛋白。
3. 表达载体pET14b-Halo-rhFGF7，其特征在于，它是在表达载体pET14b中插入了碱基序列如SEQ ID NO.1所示的基因。
4.一种大肠杆菌工程菌，其特征在于，它是上述的表达载体pET14b-Halo-rhFGF7转化到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态中。
5.重组的成纤维细胞生长因子rhFGF7，其特征在于，它是由下述方法制备的：
1）将权利要求4所述的一种大肠杆菌工程菌，在30mL含氨苄青霉素和氯霉素的LB培养基中以37℃、180 rpm的条件进行培养；
当OD600达到0.8-1.0时，将培养物转移到300mL含胰蛋白胨10g/L、酵母粉10g/L，KH2PO4 1g/L，K2HPO4 3g/L，氯化钠 4g/L的改良培养基中，180rpm、37℃进行振荡培养；收集的菌体重悬于裂解缓冲液，收集上清和沉淀；
2）洗脱、纯化；
3）用rTEV蛋白酶酶解、纯化，得rhFGF7。
6.根据权利要求2所述的重组的成纤维细胞生长因子Halo-rhFGF7或权利要求5所述的重组的成纤维细胞生长因子rhFGF7制备治疗急性肝损伤药物中的应用。
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