[发明专利]一种染黄羽鹌鹑肠道粘液细胞的Schiff氏法在审
申请号: | 201710236329.1 | 申请日: | 2017-04-12 |
公开(公告)号: | CN107014660A | 公开(公告)日: | 2017-08-04 |
发明(设计)人: | 何敏;赵飘 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30 |
代理公司: | 北京彭丽芳知识产权代理有限公司11407 | 代理人: | 彭丽芳 |
地址: | 611130 四川省成都市温*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 染黄羽 鹌鹑 肠道 粘液 细胞 schiff 氏法 | ||
1.一种染黄羽鹌鹑肠道粘液细胞的Schiff氏法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、称取0.5g碱性品红加入到100ml煮沸的蒸馏水中,轻微振荡,继续煮3min,充分溶解。然后冷却致50℃时用滤纸过滤,滤液中加入10ml1mol/LHCl,冷却致25℃时,加入0.5g偏重亚硫酸钠(Na2S2O5),充分振荡后,塞紧瓶塞,在室温暗处静置至少24h,待溶液红色褪去,呈现无色或淡黄,然后加入0.5g活性碳,用力振荡一分钟,最后用粗滤纸过滤于,得Schiff染液,存于棕色瓶中,封瓶塞,外包黑纸;
S2、选取鹌鹑十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结直肠中段1cm的组织样,置于Bouin氏液中固定,常规石蜡切片至水洗;Schiff染液染40min,水洗10min;用苏木精复染1min,分化,蓝化;最后水洗、脱水、透明、封片。
2.如权利要求1所述的一种染黄羽鹌鹑肠道粘液细胞的Schiff氏法,其特征在于,所述常规石蜡切片至水洗具体包括如下步骤:
(1)将保存于75%酒精中的组织取出,进行修样,冲洗;
(2)进行梯度酒精脱水:75%(4h)→85%(4h)→95%(2h)→100%I(1h)→100%II(1h);
(3)将完成酒精脱水后的组织进行透明处理,二甲苯I(1h)→二甲苯Ⅱ(1h),到透明程度为琥珀色时,终止透明;
(4)将完成透明处理后的组织置于60℃的苯蜡中,浸2h;
(5)包埋处理:先倒入液蜡,让组织自然下沉;等蜡块凝固;
(6)将修剪好的组织蜡块固定到切片机上进行切片,切片厚度为4-6μm;将组织切片放入37℃烘箱,24h后取出,备用;
(7)脱蜡、复水:二甲苯I(10min)→二甲苯Ⅱ(10min)→100%酒精I(5min)→100%酒精Ⅱ(5min)→95%酒精(4min)→85%酒精(3min)→75%酒精(3min),用水缓慢冲洗5min。
3.如权利要求2所述的一种染黄羽鹌鹑肠道粘液细胞的Schiff氏法,其特征在于,所述苯蜡包括50%的二甲苯、50%的蜡。
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