[发明专利]循环肿瘤细胞的捕获及释放方法有效
| 申请号： | 201710236512.1 | 申请日： | 2017-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN108690832B | 公开（公告）日： | 2021-05-28 |
| 发明（设计）人： | 朱毅敏;金雅青;濮科锋 | 申请（专利权）人： | 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人： | 王锋 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 循环 肿瘤 细胞 捕获 释放 方法 | ||
1.一种非医疗目的的循环肿瘤细胞的捕获及释放方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)利用微流控芯片流道内修饰的亲和素与可酶切的肿瘤特异性结合多肽一端标记的生物素之间的亲和作用，将可酶切的肿瘤特异性结合多肽修饰到微流控芯片流道中；
(2)在所述微流控芯片流道中通入含有肿瘤细胞的血液样本，利用可酶切的肿瘤特异性结合多肽对肿瘤细胞的特异性结合作用，实现对特定肿瘤细胞的捕获；
(3)在所述微流控芯片流道中通入选定的酶对所述可酶切的肿瘤特异性结合多肽进行剪切，实现对被捕获的细胞的释放；
所述可酶切的肿瘤特异性结合多肽的序列为WFCSWYGGDTCVQGGENLYFQGGGK-Biotin，其中靶向序列为：WFCSWYGGDTCVQ，酶切序列为：ENLYFQ。
2.根据权利要求1所述的循环肿瘤细胞的捕获及释放方法，其特征在于，在步骤(2)之前还包括：在经过步骤(1)修饰后的所述微流控芯片流道中通入一定浓度的肿瘤细胞悬浮液以验证其捕获循环肿瘤细胞的功能。
3.根据权利要求1所述的循环肿瘤细胞的捕获及释放方法，其特征在于，步骤(2)之前还包括对血液样本进行预处理的步骤：将含有肿瘤细胞的血液样本进行红细胞裂解，使得所述血液样本中的循环肿瘤细胞富集到预定浓度。
4.根据权利要求3所述的循环肿瘤细胞的捕获及释放方法，其特征在于，将含有肿瘤细胞的血液样本进行红细胞裂解，使得所述血液样本中的循环肿瘤细胞富集到预定浓度具体包括：在含有肿瘤细胞的血液样本中加入红细胞裂解液，并至少重复一次离心、去除上清液，再加入PBS重悬沉淀的步骤。
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