[发明专利]抗树鼩CD4分子单克隆抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞株与应用

说明书

本发明涉及一种抗树鼩CD4分子单克隆抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞株与应用，属于分子生物学技术领域。该杂交瘤细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心建株，保藏名称为杂交瘤细胞株TS‑CD4‑38，保藏号为CCTCC NO:C2016221，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学。其分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势，可用于检测天然树鼩淋巴细胞表面分子CD4，具有较好的灵敏度和特异性。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，涉及一个单克隆抗体，具体涉及产生特异性抗树鼩CD4分子抗体的杂交瘤细胞株和抗树鼩CD4分子抗体，以及所述抗体的应用。

背景技术

树鼩（tree shrew, Tupaia belangeri）是一种生活在热带和亚热带地区的哺乳纲攀鼩类的小型动物，形态酷似松鼠，是灵长类动物的近亲。由于树鼩具有体型小，经济易得，易驯养，繁殖能力强，饲养管理成本低、对人类病毒易感等优点，常常用于替代或减少一些非人灵长类动物的使用，所以很早就被用作灵长类目（包括人类）的疾病动物模型。近年来研究发现，在丙型肝炎、乙型肝炎、手足口疾病、肝癌、糖尿病、肿瘤等疾病的研究中得到广泛的应用。

CD4分子作为T细胞受体识别抗原复合物，在机体免疫系统的抗感染免疫中起着重要作用。CD4分子主要表达于辅助性T淋巴细胞(T helpercells, Th)的细胞膜上，其胞外区识别、结合主要组织相容性复合体II类分子，增强T细胞抗原受体(T cell receptor，TCR)与MHC分子结合的稳定性；胞内区增强白细胞CD3转导的活化信号，从而参与并调节免疫系统的活化。CD4阳性淋巴细胞群的数量指标是衡量机体细胞免疫情况的重要指标。

但目前对树鼩CD4分子方面的研究鲜有报道，且无可用的抗体来检测树鼩的CD4分子水平，对树鼩动物模型通过淋巴细胞表面分子检测分析其细胞免疫情况的评价尚属空白，严重阻碍了对树鼩这一动物模型的研究和应用。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种抗树鼩CD4分子单克隆抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞株与应用，本发明的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势，可用于检测天然树鼩淋巴细胞表面CD4分子。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种分泌抗树鼩CD4分子单克隆抗体的杂交瘤细胞株，保藏于中国典型培养物保藏中心建株，保藏名称为杂交瘤细胞株TS-CD4-38，保藏号为CCTCC NO:C2016221，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学。

本发明还提供一种由上述杂交瘤细胞分泌的抗树鼩CD4分子单克隆抗体。

本发明同时提供上述抗树鼩CD4分子单克隆抗体在制备天然树鼩淋巴细胞表面CD4分子检测试剂或试剂盒中的应用。

进一步，本发明提供一种天然树鼩淋巴细胞表面CD4分子的流式细胞分析（flowcytometry）检测试剂盒，所述的试剂盒包括用多甲藻黄素叶绿素蛋白荧光染料（PerCP）标记的抗树鼩CD4分子单克隆抗体。

进一步，本发明提供一种天然树鼩淋巴细胞表面CD4分子的蛋白免疫印迹法（western-blot）检测试剂，所述的试剂包括辣根过氧化物酶HRP标记的抗树鼩CD4分子单克隆抗体。

本发明与现有技术相比，其有益效果为：

本发明的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势，可用于检测天然树鼩淋巴细胞表面CD4分子。