[发明专利]一种防治仔猪腹泻的饲料添加剂

说明书

本发明涉及一种包含溶菌酶的饲料添加剂，其中所述溶菌酶采用发酵工艺制备，具体步骤如下：取液体培养基置于三角瓶中，按4％v/v的接种量接入溶杆菌的菌体种子，进行摇瓶发酵，发酵条件为20‑40℃，150‑300r/min，发酵培养24h后，将发酵液离心去除菌体，取上清液依次用硫酸铵盐析法、凝胶柱层析法和阳离子交换柱层析法纯化后，冷冻干燥即得。使用上述发酵工艺获得的溶菌酶饲料添加剂对仔猪腹泻具有良好的防治效果，配合中药提取物使用效果更佳。

技术领域

本发明涉及饲料领域，具体涉及一种防治仔猪腹泻的饲料添加剂。

背景技术

近年来，随着畜牧产业的高度集约化生产，畜禽疾病的发生也日趋上升，由于疾病造成的死亡率逐年增加，给畜牧业造成重大的经济损失。腹泻是影响仔猪成活率和生长发育的主要因素之一，传统预防和治疗措施是使用抗生素。虽然抗生素在畜禽饲料中的使用对于有效控制疾病、提高饲料转化率、保障畜产品的稳定供应发挥了重要作用，但是由于饲料生产中抗生素的超范围、高剂量或多品种、低剂量的长期使用，以及养殖过程中抗生素滥用和乱用，带来的细菌耐药性问题显得尤为突出。随着欧盟2006年全面禁止在饲料中使用抗生素和美国公告2017年1月1日全面禁止在饲料中使用抗生素后，抗生素替代物研发一直是动物营养研究的热点。

溶菌酶(Lysozyme)，又称细胞壁水解酶，能专一性地作用于细菌细胞壁肽聚糖分子，能使N-乙酰胞壁酸与乙酰葡萄糖氨之间的β-1,4糖苷键断裂，使细菌细胞壁变得松驰而达到溶解细菌的效果。溶菌酶广泛分布于高等动植物组织及其分泌物、原生动物、昆虫、植物以及各种微生物中。

溶菌酶作为人体正常体液及组织中的非特异免疫因子之一，具有多种药理作用，参与机体多种免疫反应，有抗菌、抗病毒的功效，在机体正常防御功能和非特异免疫中，具有保持机体生理平衡的重要作用。它可以改善和增强巨噬细胞吞噬和消化功能，激活白细胞吞噬功能，并能改善细胞抑制剂所导致的白细胞减少，从而增强机体的抵抗力。溶菌酶能直接水解革兰氏阳性菌，在分泌型免疫球蛋白A、补体的参与下，还能水解革兰氏阴性菌如大肠杆菌等。对耐药性细菌同样具有溶菌作用，而且具有疗效显著和对人体副作用小的特点，因而是一种较为理想的药用酶。溶菌酶能与带负电荷的病毒蛋白直接作用，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。溶菌酶作为酶类抗菌药，能参与粘多糖代谢，在配合内服和外用药的同时，可起到强力消炎作用，它还可与各种诱发炎症的酸性物质结合使其失活，并能够增强抗生素和其它药物的疗效，改善组织基质的粘多糖代谢，从而达到消炎、修复组织的目的。

溶菌酶是基因工程、细胞工程、发酵工程中必不可少的工具酶。在国外，溶菌酶多用于菌体内物质的提取。只要把对敏感的菌体悬液在适当缓冲液中，用溶菌酶处理，再结合使用超声波、冷冻离心等手段就可得到无细胞提取液，进一步精制可得到所需的菌体物质如蛋白质、核酸、酶及活性多肽等，因此生物工业的发展对溶菌酶制剂的需求将与日俱增。

目前，市场上见到最多的溶菌酶是蛋清溶菌酶，但其仅对革兰氏阳性菌有作用，限制了其应用范围。近年来国内外对多种来源的溶菌酶进行了广泛的研究，但有关发酵方法制备微生物溶菌酶的研究报道较少，导致此类非蛋清溶菌酶在实际工业化大生产上应用有限。

中药在抗菌同时具有改善和调节机体状态的特性，因此利用我国特有的中医理论和丰富的植物药资源开发控制仔猪腹泻制剂已经成为维持和发展养猪业的重要课题。

黄柏味苦、性寒，归肾、膀胱经。具有清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮的功效，用于湿热泻痢、黄胆、带下、热淋、脚气、骨蒸劳热、疮疡肿毒等症。

关于黄柏的药理作用已有大量的研究报道，归纳起来有如下几个方面：抗细菌、真菌、病毒及其他病原微生物的作用；抗心律失常、降血压等对心血管系统的作用；对消化系统有抗消化道溃疡、收缩或舒张肠管、促进胰腺分泌等作用；并有中枢神经系统抑制作用，抑制细胞免疫反应的作用，降血糖作用心等。