[发明专利]产3-羟基丙酸的重组菌及其制备方法与应用

权利要求书

1.重组菌的构建方法，包括对受体菌进行乙的改造，得到所述重组菌；所述乙为A1、A2、A3、A4、A5和A6；

A1、敲除所述受体菌的脂肪酸降解转录因子fadR基因或抑制所述fadR基因的表达或抑制所述fadR基因编码的蛋白质的活性；

A2、敲除所述受体菌的β-酮脂酰-ACP合酶II基因fabF基因或抑制所述fabF基因的表达或抑制所述fabF基因编码的蛋白质的活性；

A3、敲除所述受体菌的β-酮脂酰-ACP合酶III基因fabH基因或抑制所述fabH基因的表达或抑制所述fabH基因编码的蛋白质的活性；

A4、增加所述受体菌中乙酰辅酶A羧化酶acc基因或基因簇编码蛋白质的含量或增强所述acc基因或基因簇编码蛋白质的活性；

A5、增加所述受体菌中外源烷烃摄入外膜蛋白基因alkL基因编码蛋白质的含量或增强所述alkL基因编码蛋白质的活性；

A6、增加所述受体菌中丙二酸单酰辅酶A还原酶基因mcr基因编码蛋白质的含量或增强所述mcr基因编码蛋白质的活性；

所述受体菌为含有所述fadR基因、所述fabF基因和所述fabH基因的细菌或真菌。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述受体菌为大肠杆菌；

和/或，

所述acc基因或基因簇来源于谷氨酸棒状杆菌（Corynebacterium glutamicum）或/和混浊红球菌（Rhodococcus opacus）；

所述alkL基因来源于除烃海杆菌（Marinobacter hydrocarbonoclasticus）或/和恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）；

所述mcr基因来源于嗜热光全绿丝菌（Chloroflexus aurantiacus）。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述大肠杆菌为大肠杆菌BW25113；

所述fadR基因编码序列表中SEQ ID No.2所示的蛋白质；

所述fabF基因编码序列表中SEQ ID No.14所示的蛋白质；

所述fabH基因编码序列表中SEQ ID No.16所示的蛋白质；

所述acc基因或基因簇编码a7）和a8）的蛋白质：

a7）序列表中SEQ ID No.26所示；

a8）序列表中SEQ ID No.27所示；

所述alkL基因编码序列表中SEQ ID No.29所示的蛋白质；

所述mcr基因编码序列表中SEQ ID No.37所示的蛋白质。

4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于：

A4是通过向所述受体菌中导入所述acc基因或基因簇实现的；

A5是通过向所述受体菌中导入所述alkL基因实现的；

A6是通过向所述受体菌中导入所述mcr基因实现的。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：

所述fadR基因为序列表中SEQ ID No.1所示的cDNA分子或DNA分子；

所述fabF基因为序列表中SEQ ID No.13所示的cDNA分子或DNA分子；

所述fabH基因为序列表中SEQ ID No.15所示的cDNA分子或DNA分子；

所述acc基因或基因簇为序列表中SEQ ID No.25的第15-3259位所示的cDNA分子或DNA分子；

所述alkL基因为序列表中SEQ ID No.28所示的cDNA分子或DNA分子；

所述mcr基因为序列表中SEQ ID No.36所示的cDNA分子或DNA分子。