[发明专利]一种ASE‑HPLC法测定迷蒙花中蒙花苷含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学检测领域，尤其是一种ASE-HPLC法测定迷蒙花中蒙花苷含量的方法。

背景技术

《中国药典》2015年版一部制备供试品方法：取本品粉末约0.5g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60～90℃)100ml，加热回流2小时，弃去石油醚，药渣挥干，再加甲醇100ml继续加热回流4小时，提取液置蒸发皿中，浓缩至适量，转移至50ml量瓶中，残渣及容器用少量甲醇洗涤，洗液并入同一量瓶中.加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

该方法回流时间较长，且对技术人员的专业水平要求较高。

发明内容

针对上述不足，本发明旨在提供一种ASE-HPLC法测定迷蒙花中蒙花苷含量的方法，该方法萃取所需时间短，且检测精度高。

为了实现上述技术效果，本发明提供的技术方案是这样的：一种ASE-HPLC法测定迷蒙花中蒙花苷含量的方法，依次包括下述步骤：

步骤1：采用ASE法萃取迷蒙花粉末，并收集甲醇萃取液；其中萃取包括先用正己烷去酯，再用40％甲醇萃取；

步骤2：采用HPLC法测定甲醇萃取液中蒙花苷的含量。

优选地，所述的步骤1包括下述子步骤：

步骤S1：将迷蒙花粉碎，过三号筛，取0.5g与1g硅藻土混合均匀；

步骤S2：将步骤S1所得的混合物装于放有玻璃纤维滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；

步骤S3：用正己烷去酯，再用40％甲醇萃取；

步骤S4：结束后，将其烘干，并用甲醇定容至50ml，过滤，取滤液，即可。

优选地，所述的去酯条件为：溶剂为正己烷，温度为80℃，时间为7min，循环次数为1次，冲洗体积为100％，吹扫时间为200s。

优选地，所述的提取条件为：溶剂为甲醇，温度为100℃，时间为5min，循环次数为2次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s。

优选地，步骤2所述的HPLC法的检测参数为：

a)仪器：安捷伦1290高效液相色谱仪；

b)色谱柱：ThermoSyncronis C18；

c)柱温：40℃；

d)流速：0.5mL/min；

e)流动相：甲醇-0.1％冰醋酸；

f)检测波长：326nm。

优选地，所述的色谱柱的规格为3μm，3×100mm。

优选地，所述的流动相为体积比等于48：52的甲醇-0.1％冰醋酸。

本发明与传统方法相比，具有以下优点：

《中国药典》采用石油醚去脂溶性成分，考虑ASE仪器对溶剂的使用要求，以及石油醚为宽沸程的烃类成分，本实验考察了正己烷去脂效果，结果使用正己烷循环1次，杂质峰较小，对蒙花苷的定量影响。参考《中国药典》采用甲醇作为提取溶剂，能提取完全。

本实验提取溶剂为甲醇，依据经验，采用萃取温度100℃、静态萃取时间5min，利用单因素考察了循环次数1次、2次、3次，结果见表5，循环2次基本能提取完全。

附图说明

图1为以蒙花苷对照品的浓度(μg)-平均峰面积进行线性回归图；

图2为蒙花苷对照品的色谱图；

图3为采用ASE法萃取所得的供试品溶液色谱图；

图4为采用药典方法提取所得的供试品溶液色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的权利要求做进一步详细说明，但不对本发明构成任何限制，任何在精神上和原则上对本发明的权利要求书保护范围做修改、等同替换和改进，仍属于本发明所要保护的范围。

实施例1

1、仪器设备及试剂

1.1仪器：

电子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶剂萃取仪(美国DIONEX公司)、安捷伦1290高效液相色谱仪

1.2试剂：

水：符合GB/T 6682规定的一级水；

甲醇(CH₄O)：色谱纯；

冰醋酸(CH₃COOH)：分析纯。

2、方法

2.1对照品溶液的制备：

取蒙花苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

2.2供试品溶液的制备

2.2.1《中国药典》2015年版一部制备供试品方法：