[发明专利]大白菜Bra000758移码突变检测标记及其在抗病育种中的应用

说明书

本发明公开了一种鉴定大白菜WRKY19编码基因Bra000758野生型和突变体的共显性标记，所述共显性标记包括：与野生型相关的标记Bra000758W，片段大小151bp，如SEQ ID No.1所示；与突变体相关的标记Bra000758m，大小148bp，如SEQ ID No.2所示。本发明获得的了一对区分大白菜WRKY19编码基因Bra000758野生型和突变体的共显性标记，可以将该共显性标记用于筛查大白菜种群，提供高效的大白菜抗病WRKY19编码位点的检测手段，通过本发明的共显性标记检测出的携带野生型基因的材料可以作为抗病育种的重要材料，用于培育抗病大白菜新品种。

技术领域

本发明涉及蔬菜育种技术领域，具体涉及一种大白菜Bra000758移码突变检测标记及其在抗病育种中的应用。

背景技术

WRKY是植物转录因子中的一个超大家族，因其编码蛋白中含有高度保守的WRKY结构域而得名(Agarwal P,Reddy MP,Chikara J,2011.WRKY:its structure,evo-lutionaryrelationship,DNA-binding selectivity,role in stress tolerance and developmentof plants.Mol Biol Rep,38,6,pp3883～3896)。WRKY家族各成员之间氨基酸序列差异较大，暗示它们参与植物体各种生命活动，目前对WRKY转录因子的研究主要集中在其应对生物及非生物胁迫中的调控作用(Pandey SP,Somssich IE,2009.The role of WRKYtranscription factors in plant immunity.Plant Physiol,150卷第4期,pp1648～1655；Baksh i M,Oelmuller R(2014).WRKY transcription factors:jack of manytrades in plants.Plant Signal Behav,9卷第1期,e27700)。Noutoshi等(Noutoshi Y,Ito T,Seki M,Nakashita H,Yoshida S,Marco Y,Shirasu K,Shinozaki K.2005.Asingleamino acid insertion in the WRKY domain of the Arabidopsis TIR-NBS-LRR-WRKY-type disease resistance protein SLH1(sensitive to low humidity 1)causesactivation of defense responses and hypersensitive cell death.The PlantJournal,第43卷,pp873～888)在研究一个拟南芥TIR-NBS-LRR-WRKY突变基因slh(sensitive to low humidity)1的功能时，指出其与拟南芥编码WRKY19的基因At4g12020功能类似，都是含有WRKY结构域的抗病R基因。

大白菜(Brassica rapa ssp.Pekinensis)又名结球白菜，为十字花科(Cruciferae)芸薹属一、二年生蔬菜，以叶片为食用部位，富含碳水化合物、蛋白质、纤维素和微量元素，是一种深受人们喜爱的蔬菜。目前从大白菜中鉴定的WRKY TF基因不多，仅有少量的文献报道(Kim SS，Ko YJ，Jang JY，et al.Isolation and expression anal-ysisof Brassica rapa WRKY 7[J].Plant Pathology Journal，2008，24(4):478-481.)。WRKY19是WRKY家族的成员之一，有关其野生型和突变体中大白菜中的功能与抗病的关系至今未见报道。