[发明专利]花叶万年青的原种制作方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物栽培技术领域，具体说是一种花叶万年青的原种制作方法。

背景技术

花叶万年青，别名哑秆，天南星科，种拉丁名为Dieffenbachia picta(Lodd.)Schott，性喜高温多湿的半阴环境，忌强光直射，生长适温18-25℃，冬季生长温度15℃以上，如低于10℃则叶片发黄脱落。要求疏松肥沃、排水良好的土壤。可用扦插或组织培养法(即组培法)繁殖。

目前，花叶万年青的组培工艺通常包括：母本——原种制作——初代培养——初代切割与细菌检测——增殖切割——过渡培养——生根培养——出货。其中，原种制作是组培工艺中非常关键的一步。现有的花叶万年青原种制作方法，通常采用以下步骤：

1、预处理：将选择好的母株置于干燥、通风良好的资源圃或苗床上，制种前15～25d停止浇水、施肥，使其自然干燥，干燥程度由两个方面判断：1)基质土层干燥，用手捏呈散沙状，不粘手；2)植株萎蔫程度：整株萎蔫。

2、采种：用刀片去除叶片以及基部和茎段间的一些明显的杂质，切成1个芽1段，顶芽去除外苞片并去除杂质，用洗衣粉浸泡并用清水冲洗干净；根据茎段、顶芽大小及老嫩程度进行分类。

3、消毒：在无菌工作台上根据外植体(即茎段和顶芽)的大小进行分瓶，每瓶5～8个，喷酒精5～8S后用质量浓度为1.0wt‰的升汞水溶液进行消毒20～40min，然后用无菌水冲洗3次，每隔3～5min换1次。然后切除外植体两端变色部分以及四周被腐蚀的部分，使外植体露出新鲜组织再接种到培养基上。

采用上述的花叶万年青原种制作方法，制作周期通常在3个月左右，真、细菌污染率及死亡率高，原种制作成功率只能达到50％左右。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种制作周期短、真细菌污染率低、原种成活率高的花叶万年青的原种制作方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

花叶万年青的原种制作方法，包括：

预处理：将母株置于18～25℃、相对湿度为15～20％、通风良好的环境中晾3～8天，期间停止浇水、施肥；

采种：去除叶片以及基部和茎段间的杂质，采用顶芽和茎段作为外植体，顶芽去除外苞片并去除杂质，茎段按1个侧芽1段进行切割，用洗衣粉浸泡外植体并用清水冲洗干净；

消毒：将外植体用升汞水溶液消毒25～30min，消毒后用无菌水清洗干净，然后切除外植体两端变色部分以及四周被腐蚀的部分，使外植体露出新鲜组织再接种到培养基上；

培养：控制培养时的温度为26±1℃，光照度为300～500lx。

本发明的有益效果在于：区别于现有技术，本发明加强了对母本的预处理和外植体的消毒，并优化培养工艺，整个制作周期可大大缩短至50～60天，顶芽萌动时间仅需5～8天，茎段的芽萌动时间仅需8～13天，而且无论是顶芽还是茎段，均没有出现真菌污染，彻底消除了真菌污染现象，茎段无真、细菌污染以及死亡现象，外植体的总体成活率可达70％以上。

具体实施方式

为详细说明本发明的技术内容、所实现目的及效果，以下结合实施方式予以说明。

本发明最关键的构思在于：加强对母本的预处理和外植体的消毒，并优化培养工艺。

具体的，本发明提供的花叶万年青的原种制作方法，包括：

预处理：将母株置于18～25℃、相对湿度为15～20％、通风良好的环境中晾3～8天，期间停止浇水、施肥；

采种：去除叶片以及基部和茎段间的杂质，采用顶芽和茎段作为外植体，顶芽去除外苞片并去除杂质，茎段按1个侧芽1段进行切割，用洗衣粉浸泡外植体并用清水冲洗干净；

消毒：将外植体用升汞水溶液消毒25～30min，消毒后用无菌水清洗干净，然后切除外植体两端变色部分以及四周被腐蚀的部分，使外植体露出新鲜组织再接种到培养基上；

培养：控制培养时的温度为26±1℃，光照度为300～500lx。

其中，所述升汞水溶液的浓度为1.5wt‰。

其中，用升汞水溶液消毒25～30min后，用无菌水清洗3～5次，每次3～5min。

其中，所述培养基中包含有TDZ、KT、蔗糖和卡拉胶，TDZ的含量为0.05mg/L，KT的含量为0.2mg/L。

其中，所述培养基中还包含有AMS和2-IP，所述2-IP的含量为3mg/L。

其中，所述培养基的pH值为5.8。