[发明专利]大芦荟的原种制作方法

说明书

本发明涉及一种大芦荟的原种制作方法，包括：将母株置于20～30℃、相对湿度为15～20％、通风良好的环境中晾3～8天；将母株顶芽切下，剥除叶片，留顶芽15～20mm，用洗衣粉溶液漂洗5～6min，然后用清水冲洗干净；将外植体用升汞水溶液消毒25～30min，消毒后用无菌水清洗干净，然后切除外植体被升汞腐蚀的部分，使外植体露出新鲜组织再接种到培养基上；控制培养时的温度为26±1℃，光照度为300～500lx。本发明方法适于采用叶片和顶芽作为外植体，顶芽萌动时间仅需5～8天，叶片长芽时间仅需8～13天，无真、细菌污染，顶芽成活率可达100％，而且制作周期短。

技术领域

本发明涉及植物栽培技术领域，具体说是一种大芦荟的原种制作方法。

背景技术

大芦荟，别名龙角花、龙角芦荟、鹿角芦荟、蜈蚣掌，百合科，喜温暖干燥和阳光充足环境，不耐寒，生长适温20～30℃，冬季不低于5℃，低温能促进花芽形成，耐旱力强。可用分株、扦插繁殖或组织培养法(即组培法)繁殖。分株繁殖于3～4月份结合换盆进行。取下母株周围的幼株，按其大小分别上盆，如幼株带根太少，可先在沙床中培养，待生根后上盆。扦插繁殖于5～6月开花后进行，插条约15cm，除去基部两片侧叶，晾置一天后插于细沙或珍珠岩中，约20天可生根。

目前，大芦荟的组培工艺通常包括：母本——原种制作——初代培养——初代切割与细菌检测——增殖切割——过渡培养——生根培养——出货。其中，原种制作是组培工艺中非常关键的一步。现有的大芦荟原种制作方法，通常采用以下步骤：

1、预处理：将选择好的母株置于干燥、通风良好的温室苗床上，制种前10～15d停止浇水、施肥，使其自然干燥，干燥程度由两个方面判断：1)基质土层干燥，用手捏呈散沙状，不粘手；2)植株萎蔫程度：整株呈重度萎蔫状。

2、采种：将整株植株取出，剥下叶片，将顶芽处理为约15～20mm大小；然后用棉花沾无菌水(加洗洁精)擦洗叶片表面，特别叶片着生部位擦干净；擦完再同顶芽用无菌水清洗一遍。

3、消毒：按叶片及顶芽的大小及老嫩程度进行分类，放置于无菌空瓶中，每瓶5～8个外植体，用浓度为1wt‰的升汞水溶液进行消毒(消毒时间：顶芽：15min；叶片：20min)，然后用无菌水清洗3～5遍(每次3～5min)，直至没有泡沫。

4、培养：切去顶芽两端被升汞腐蚀而变色部分(叶片不切)，接入培养基中(1个芽/瓶)进行培养。

采用上述的大芦荟原种制作方法，叶片经过培养后并没有芽的形成，说明该方法并不适合采用叶片作为外植体，而顶芽的成活率也只能达到80％左右，20％以上的顶芽在培养过程中会受到真、细菌污染而死亡，而且整个制作周期通常在3个月以上。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种适于采用叶片和顶芽作为外植体，无真、细菌污染，顶芽成活率可达100％，而且制作周期短的大芦荟的原种制作方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

大芦荟的原种制作方法，其特征在于，包括：

预处理：将母株置于20～30℃、相对湿度为15～20％、通风良好的环境中晾3～8天，期间停止浇水、施肥；

采种：将母株顶芽切下，剥除叶片，留顶芽15～20mm，得到的叶片和顶芽作为外植体用洗衣粉溶液漂洗5～6min，然后用清水冲洗干净，所述洗衣粉溶液由0.5～1重量份的洗衣粉与1000重量份的无菌水混合配制而成；

消毒：将外植体用升汞水溶液消毒25～30min，消毒后用无菌水清洗干净，然后切除外植体被升汞腐蚀的部分，使外植体露出新鲜组织再接种到培养基上；

培养：控制培养时的温度为26±1℃，光照度为300～500lx。