[发明专利]分子量可控的家蚕再生丝素蛋白生产方法有效
申请号: | 201710259106.7 | 申请日: | 2017-04-19 |
公开(公告)号: | CN107043412B | 公开(公告)日: | 2021-05-25 |
发明(设计)人: | 关国平;王璐;王富军;林婧;邹婷 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K1/36;C07K1/34 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹;王婧 |
地址: | 200050 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分子量 可控 家蚕 再生 丝素 蛋白 生产 方法 | ||
1.一种分子量可控的家蚕再生丝素蛋白生产方法,其特征在于,包括:
第1步:脱胶∶将茧丝或厂丝和蒸馏水按照1g∶50-150mL蒸馏水的比例投入丝素蛋白脱胶装备中在超声条件下进行脱胶,脱胶温度控制在60-90℃,超声波频率范围控制在20-100kHz,超声波功率范围控制在300-1800W,脱胶时间为30-90min,将脱胶后的丝素纤维进行干燥;
第2步:溶解:将脱胶且干燥后的丝素纤维按照1g∶10mL5MLiBr溶液的比例进行搅拌溶解,并采用频率为20kHz,功率为300W的超声波辅助溶解,溶解温度25℃,溶解时间60min;
或将脱胶且干燥后的丝素纤维按照1g∶10mLCaCl2∶C2H5OH∶H2O摩尔比为1∶2∶8的混合溶液的比例进行搅拌溶解,并采用频率为50kHz,功率为800W的超声波辅助溶解,溶解温度85℃,溶解时间30min;
第3步:透析:用150-250目滤网对溶解后的丝素蛋白溶液进行过滤,再灌装到透析袋中,溶液体积占透析袋容积的1/2-1/4,将透析袋置入再生丝素蛋白透析装置,室温下先用自来水透析6-18h,再用蒸馏水透析6-18h;
第4步:干燥:透析后的丝素蛋白溶液冷冻干燥,得到分子量分布范围在208kDa-460kDa的再生丝素蛋白或分子量分布范围在31kDa-50kDa的再生丝素蛋白;
第5步:将再生丝素蛋白包装和灭菌。
2.如权利要求1所述的分子量可控的家蚕再生丝素蛋白生产方法,其特征在于,所述第1步中的茧丝,在投入之前剪成宽1cm的条带。
3.如权利要求1所述的分子量可控的家蚕再生丝素蛋白生产方法,其特征在于,所述第3步中的透析袋的截留分子量范围为8-12kDa。
4.如权利要求1所述的分子量可控的家蚕再生丝素蛋白生产方法,其特征在于,所述第4步中的冷冻干燥为将透析后的丝素蛋白溶液装入大口径容器中,在-80℃冷冻8h,在-60℃冷冻干燥器中干燥8h,得到再生丝素蛋白。
5.如权利要求4所述的分子量可控的家蚕再生丝素蛋白生产方法,其特征在于,所述第4步所述的大口径容器的高度为0.8-2.5cm,长度为40-50cm,宽度为25-35cm。
6.如权利要求1所述的分子量可控的家蚕再生丝素蛋白生产方法,其特征在于,所述的第5步中的包装和灭菌为将再生丝素蛋白真空密封、避光包装,以γ-射线灭菌后-20℃保存。
7.如权利要求6所述的分子量可控的家蚕再生丝素蛋白生产方法,其特征在于,所述第5步中的γ-射线,其剂量为(1.5-5)×104Gy。
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