[发明专利]一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法

说明书

本发明公开了一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，包括以下步骤：(1)辣椒果准备；(2)菌种的选择；(3)辣椒果接种；(4)病情调查与评价。本发明的辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，其优势在于发病时间短、对病菌的需求量小，且解决了大量培养菌的耗时耗力问题；同时可以量化，能有效区分抗感疫病品种；本方法快速简洁，操作简单，可大量筛选品种，有利于抗病品种的筛选；而且，可保存辣椒原有植株，并且对植株的生长无影响；在辣椒青果期都可以进行试验，青果期2个月，试验周期耗时短，试验时间充足。

技术领域

本发明涉及植物植物病害侵染技术领域，特别涉及一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法。

背景技术

辣椒(Capsicum annuum L.)，原产于中拉丁美洲热带地区的墨西哥。15世纪末，哥伦布发现美洲之后把辣椒带回欧洲，并由此传播到世界其他地方。辣椒于明代传入我国，如今在我国各地普遍栽培，成为一种大众化蔬菜。

辣椒在栽培过程中，病虫害种类繁多，危害严重。其中，辣椒疫病在我国的发生危害日益严重，已成为影响辣椒生产的主要病害之一。该病由辣椒疫霉菌(Phytophthoracapsici)引起，是以孢子囊在土壤、田间病残体上越冬，以孢子囊萌发产生游动孢子侵染根部引起病害。该病害发病周期短，流行速度快，常导致辣椒植株成片死亡，给辣椒产业带来严重的经济损失。一般病株率为20-30％，严重时达80％以上。

目前，抗病品种的选育和推广是控制辣椒疫病的主要手段。而较为常用的辣椒疫病的接种方法主要是采用离体叶片接种和游动孢子液灌根接种。虽然这两种接种方法均可以将辣椒对疫霉菌的反应区分开，但是这两种方法却都有着自身无法克服的缺点，比如：离体叶片接种法由于叶片面积相差较大，因此在接种量一样的情况下，根据病斑面积进行比较就无法反映出品种的抗性，同时离体叶片法不适宜进行量化，因而不好分级，只能进行初步的鉴定；游动孢子液灌根接种法基本上模拟田间病害的发生过程，最能反映品种的真实抗性，但是需要培养孢子，较麻烦，尤其是当鉴定的品种数量较多的时候，需要大量的孢子，工作量很大，操作较复杂。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，从而克服现有技术的上述缺陷。

本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：

一种辣椒疫病抗性果实侵染鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)辣椒果准备：选取不同类型的辣椒品种进行种植，采收健康完整的辣椒果备用；

(2)菌种的选择：将在室内低温保存的辣椒疫霉病菌菌种接种在燕麦固体培养基上进行培养，在25℃-28℃下恒温暗培养3天至白色菌丝充分生长繁殖布满整个培养基表面，继续培养4天，然后在25℃-28℃恒温下光/暗交替培养7天至产生孢子囊，再切割菌饼备用；

(3)辣椒果接种：将步骤(1)的辣椒果用灭菌水冲洗干净，用酒精冲洗灭菌，然后用吸水纸拭去表面的水分，在铁盘内垫上双层滤纸，将辣椒果放在上面，用灭菌刀片在果上切去直径7mm表皮，将小菌饼有菌丝的一面紧贴在伤口上，温度控制在30℃，光照16h后，25℃黑暗培养8h，采用保鲜膜覆盖在铁盘上面保湿，促使病害的发生；

(4)病情调查与评价：接种3天后，调查每个接种点发病情况，按分级标准进行病情级数调查，并计算出每个辣椒果的病情指数：

辣椒果接种法调查标准分五级：0级—无病；1级—果面上出现水浸状病斑，病斑直径≤2厘米；2级—果面上出现水浸状病斑，病斑直径2-4厘米；3级—果面上的水浸状病斑已严重变软，果表皮与果肉分离，病斑直径≥4厘米；4级—果面上的水浸状病斑已完全或几乎覆盖果表面；

病情指数＝∑(各级病果数×相对级值)/(调查总果数×最高级值)×100；