[发明专利]NAC062D转录因子蛋白及其编码基因在抑制种子发芽中的应用

说明书

一种NAC062D转录因子蛋白，是膜结合转录因子NAC062去掉跨膜域后的活性形式，其氨基酸序列为序列表中的序列1，其核苷酸序列为序列表中的序列2。所述的NAC062D转录因子蛋白的编码基因导入目的植物的转基因植物培育方法，将NAC062D蛋白的编码基因导入目的植物中，得到转基因植物；转基因植株特征：1)正常情况下与非转基因没有区别；2)加入10uM诱导剂beta‑estrodial(beta‑E)后，转基因植物的发芽率远低于非转基因。所述转基因植物抑制种子发芽体现在所述转基因植株的发芽率均低于所述目的植物。本发明提供了将一个调控植物种子发芽的转录因子NAC062D及其编码基因导入拟南芥哥伦比亚生态型中，得到转基因植物，发现转录因子可以用于调控种子发芽。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地涉及一种膜结合转录因子NAC062的活性形式NAC062D蛋白及其编码基因在抑制种子发芽中的应用。

背景技术

孟山都公司研究人员从矮牵牛中克隆获得了抗性基因(EPsPs基因)，并应用粒介导转移脱氧核糖核酸(DNA)技术，将矮牵牛质粒(caMv)中35s启动子控制的EPsPs基因导入大豆基因组中，进而培育出抗草甘膦大豆品种。这种转基因大豆于1994年被美国食品与药品管理局(FDA)批准，较早成为商业化大规模推广的生产转基因作物之一。由于RR豆具有耐除草剂草甘膦基因，这种大豆对非选择性除草剂农达(Rwndup)有高度耐受性。在大田中施用草甘膦除草剂，不会影响大豆产量。此外，转基因大豆还有其他类型，如高蛋氨酸大豆品种等，但转基因大豆的毒性和安全隐患问题一直备受争议，如下：

1.说转基因不能留种，而只能买新鲜转基因种，转基因种子也只有研究转基因的人专营，这就不免让人联想到利益的趋势，一旦利益驱使，就难免派生不良的理念；

2.例如黄豆需要转化成豆芽的时候，转基因就不能办到，必须购买能转化成豆芽的非转基因。

随着环境污染日益加剧，温室效应加剧，地表气温上升，四季气温变化异常，雾霾天气也不断发生，严重影响了农作物的生长发育，继而影响粮食产量。因此，在未来很长一段时间内，农业研究可能将重点关注如何提高植物在各种恶性环境条件下的抗逆性。研究表明，拟南芥膜结合转录因子在调控植物生长发育、逆境胁迫应答等中起着重要的作用。NAC膜结合转录因子是拟南芥重要的转录因子家族之一，是近年来发现的具有多种生物功能的植物特异转录因子。

发明内容

本发明公开了一种膜结合转录因子NAC062的活性形式NAC062D蛋白及其编码基因在抑制种子发芽中的应用。

本发明的目的及解决的主要技术问题是采用以下技术方案来实现的：一种NAC062D转录因子蛋白，其特征在于，NAC062全长蛋白是一个具有跨膜域(TM)的膜结合转录因子，而NAC062D是其去掉跨膜域后的截短形式，其氨基酸序列为序列表中的序列1，其核苷酸序列为序列表中的序列2，是膜结合转录因子NAC062的活性形式。

本发明提供的转基因植物培育方法，为将NAC062D蛋白的编码基因导入目的植物中，得到转基因植物；所述转基因植株特征：1)正常情况下与非转基因没有区别；2)加入10uM诱导剂beta-estrodial(beta-E)后，转基因植物的发芽率远低于非转基因。

在上述方法中，所述目的植物为双子叶植物和单子叶植物。

在上述方法中，所述双子叶植物为拟南芥，油菜、花生、棉花、大豆、向日葵、棕榈树、橄榄树、蓖麻、马铃薯或烟草；所述单子叶植物为水稻、玉米、小麦、大麦、燕麦、黑麦、高粱或草坪草。

所述目的植物为拟南芥或油菜。

所述方法，NAC062D蛋白的编码基因通过重组载体导入目的植物，所述重组载体为1)或2)：

1)转录激活活性鉴定：将所述NAC062D蛋白的编码基因插入PGBK-T7中得到的载体；