[发明专利]一种同时测定野菊花中七种成分的含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种同时测定野菊花中多钟成分的含量的方法，尤其是一种同时测定野菊花中七种成分的含量的方法，属于化学检测技术领域。

背景技术

野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥头状花序，具清热解毒、泻火平肝之功效，常用于疔疮痈肿，目赤肿痛，头痛眩晕。主要成分有黄酮类、萜类、挥发油、野菊花内酯、胡萝卜苷、氨基酸及微量元素等多种物质。实验研究表明野菊花具有一定的抗炎和镇痛作用，绿原酸、木犀草苷、芹菜素和蒙花苷为野菊花的抗炎药效组分。目前多采用高效液相色谱外标法对野菊花中上述成分进行含量测定，戴胜等用HPLC测定野菊花药材中8种黄酮和有机酸的含量，申海进等用RP-HPLC测定野菊花中槲皮素、木犀草素、芹菜素和刺槐素的含量。

《中国药典》2015年版野菊花控制指标为蒙花苷，单成分含量难以进行整体质量评估，但多成分质量控制要求对照品的种类比较多，而部分对照品价格昂贵甚至供应量非常少，无法满足检测需求。一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single-marker,

QAMS)依据中药材内各有效成分间的某些内在关系，选择价廉、易得的成分为内参物，建立该成分与其他成分间的相对校准因子(relative correction factor,RCF),通过RCF计算其他成分的含量。

发明内容

针对上述技术问题，本发明的目的是同时提供一种同时测定野菊花中七种成分的含量的方法，该方法高效准确、重现性良好。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是这样的：

一种同时测定野菊花中七种成分的含量，其特征在于，依次包括下述步骤：

1)对照品溶液的制备

分别精密称取绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、蒙花苷、木犀草素、芹菜素对照品适量，加甲醇溶解并定容，制成质量浓度分别为0.8469mg.mL^-1、0.5670mg.mL^-1、0.3967mg.mL^-1、0.6738mg.mL^-1、0.1962mg.mL^-1、0.6244mg.mL^-1、1.049mg.mL^-1的对照储备液，再分别精密吸取7个对照品储备液0.6、0.9、1.3、0.8、2.5、0.8、0.5mL，置同一25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得混合对照品溶液A，精密吸取对照品溶液A 1mL至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，制得混合对照品溶液B，避光保存；

2)快速溶剂萃取法制备供试品溶液

取本品粉末0.25g，与1g硅藻土混合均匀填充于5mL萃取池，按快速溶剂萃取仪优化的条件进行提取，萃取溶剂为甲醇、萃取温度100℃、静态萃取时间7min、冲洗体积60％、循环萃取2次，萃取结束后，将萃取液浓缩至5mL后，转移至10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

3)将对照品溶液和试品溶液分别注入色谱仪检测，色谱柱为Syncronis C18，流动相为乙腈-0.5％磷酸水溶液进行梯度洗脱；流速0.5mL.min^-1，检测波长334nm，柱温35℃，进样量2μL；

4)取混合对照品溶液，分别进样0.2、0.5、1、2、3、4、5μL，在上述色谱条件下测定其峰面积，以各成分进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程及相关系数。

进一步的，上述的一种同时测定野菊花中七种成分的含量，所述的梯度洗脱程序为0～4min，10％～20％乙腈，90％～80％磷酸水溶液；4～10min，20％～26％乙腈，80％～74％磷酸水溶液；10～18min，26％～30％乙腈，74％～70％磷酸水溶液；18～20min，30％～40％乙腈，70％～60％磷酸水溶液；20～20.5min，40％～80％乙腈，60％～20％磷酸水溶液；20.5～23min，80％乙腈，20％磷酸水溶液；23.1min，10％乙腈，90％磷酸水溶液。

本发明与现有技术相比，具有以下优势：