[发明专利]一种笋壳多酚物质测定方法

说明书

本发明公开了一种笋壳多酚物质测定方法，属于植物多酚制备检测领域。所述方法包括：(1)多酚物质提取：以笋壳干粉末为原料，超声波辅助有机溶剂浸提，获得笋壳浸提液，再经大孔树脂分离获得多酚提取液；(2)已知组分含量测定：绘制已知组分标准品浓度与超高效液相色谱峰面积之间关系的标准曲线，利用超高效液相色谱对所述多酚提取液进行分析，测得对应已知组分的峰面积，根据标准曲线计算得到已知组分的含量；(3)未知组分鉴定分析：利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱，鉴定所述多酚提取液中的其余多酚物质。本发明方法分析检测结果准确，而且操作简单、重复性好，为进一步研究植物中的多酚物质提供技术平台。

技术领域

本发明涉及植物多酚制备检测领域，具体涉及一种笋壳多酚物质测定方法。

背景技术

竹子的幼茎即竹笋，因其质嫩味美，营养丰富，素有“寒土山珍”之美誉。我国作为竹子生产大国，每年有约400万吨竹笋加工，产生了大量笋壳等废弃物，除少数笋壳被加工成包装材料、中高档用纸或深加工成动物饲料外，其余都当作废料处理，既污染了环境，又造成了资源浪费。

目前涉及笋壳的研究报道较少，为了实现竹笋资源的深度转化和综合利用，首要解决的关键问题之一，就是对笋壳进行系统的组分分析，探索其中最有开发利用价值的功能活性成分，进行定性和定量研究，为工艺学和功能性研究奠定基础。已有研究显示，笋壳中富含多种生物活性分子，其中以多酚、甾醇、萜类和黄酮等为主要成分，其中多酚的邻位酚羟基极易被氧化，具有很强的抗氧化活性和清除自由基的能力。研究表明多酚物质具有抗肿瘤、抗氧化、抗动脉硬化、防治冠心病与中风等心脑血管疾病以及抗菌等多种生理功能，因此其在食品、医药及化工用品方面具有极大的应用价值。

现下多酚类物质的提取方法主要包括溶剂提取、微波及超声波辅助提取、酶法提取、超临界流体萃取等。如申请公布号为CN 103585498A的专利文献公开了一种竹笋中多酚的提取和检测方法，其中利用超声波辅助有机溶剂低温提取竹笋中多酚，具体公开：取出一定量竹笋置于研钵中，加入液氮研碎，按1g竹笋加入10mL 30％丙酮进行提取，于10℃以下低温超声提取15～60min，离心取上清，即得竹笋多酚提取液；超声提取频率为40kHz，超声功率150W，提取时间为45min。

鉴于多酚易氧化的特性，合理的提取时间和温度对防止多酚结构被破坏极为关键，因此保持多酚生物活性的同时提高提取效率，建立高效、快捷、经济、实用的提取方法，并对多酚物质进行鉴定分析，为笋壳的再利用提供理论指导，是本领域技术人员需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种笋壳多酚物质测定方法，为笋壳的再利用研究提供更有效、快捷的鉴定手段。

一种笋壳多酚物质测定方法，包括：

(1)多酚物质提取：以笋壳干粉末为原料，超声波辅助有机溶剂浸提，获得笋壳浸提液，再经大孔树脂分离获得多酚提取液；

(2)已知组分含量测定：绘制已知组分标准品浓度与超高效液相色谱峰面积之间关系的标准曲线，利用超高效液相色谱对所述多酚提取液进行分析，测得对应已知组分的峰面积，根据标准曲线计算得到已知组分的含量；

(3)未知组分鉴定分析：利用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱，鉴定所述多酚提取液中的其余多酚物质。

步骤(1)中，笋壳干粉末由新鲜笋壳50℃烘干后粉碎制得，为提高提取率，将粉末过280μm筛子，再加入到液料比为10～30:1的体积百分比浓度为30～70％的乙醇溶液，在30～70℃条件下超声提取10～50min，再冷却、抽滤获得多酚浸提液。

作为优选，所述有机溶剂为体积百分比为60％的乙醇溶液，与笋壳干粉末的液料比为25:1。

作为优选，浸提的温度为70℃。

作为优选，超声波辅助浸提的时间为40min。