[发明专利]一种抑制MSCs成纤维分化的方法、MSCs和DNA片段

说明书

本发明提供一种抑制MSCs成纤维分化的方法、MSCs和DNA片段。其中，所述方法通过抑制Axin1基因的表达即可抑制Wnt/β‑Catenin信号通路蛋白β‑Catenin、GSK‑3β和JNK的表达，以及抑制成纤维细胞表面分子标记Vimentin、α‑SMA的表达，从而获得成纤维分化能力受到抑制的MSCs，降低MSCs在临床治疗中分化为成纤维细胞的副作用。

技术领域

本发明涉及干细胞领域，具体而言，涉及一种抑制MSCs成纤维分化的方法、MSCs和DNA片段。

背景技术

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)，来源于发育早期的中胚层，属于多潜能成体干细胞，是干细胞家族的重要成员；其最先在骨髓中被发现，并广泛分布在人体里，比如骨髓、脐带、脂肪、脐带血、羊膜、(胎盘)绒毛膜、牙髓、胸腺、滑膜、胎儿血和肝脏中。

MSCs具有干细胞的一般生物学特点：具有自我复制能力和多项分化潜能；属非终末分化细胞，终生保持未分化或低分化特征，缺乏分化标记；分化情况受所处微环境(干细胞壁龛)的影响；通过对称性和非对称性分裂两种方式生长；具有分裂的慢周期性，绝大多数干细胞处于G₀期等。

实验研究已经证实，MSCs在体内或体外特定的诱导条件下，可分化成为：骨、软骨、脂肪、肌肉、肌腱、神经样细胞、心肌细胞、支持造血干细胞的基质细胞等多种细胞。

目前，间充质干细胞治疗在临床上被用于治疗一些难治性疾病，如脊髓损伤、脑瘫、肌萎缩侧索硬化症、系统性红斑狼疮、系统性硬化症、克隆氏病、中风、糖尿病、糖尿病足、肝硬化、SARS、流感、慢性阻塞性肺炎等。根据初步的临床报告，间充质干细胞对这些疾病的治疗都取得明显的疗效。

但同时MSCs在疾病治疗上也存在副作用，其中最突出的副作用之一即为MSCs被注入到人体内后存在被诱导分化为成纤维细胞的风险，可能导致组织或器官内纤维结缔组织增多，实质细胞减少，组织过度增长、变硬以及形成瘢痕组织，使得组织或器官的结构被破坏、功能出现减退，乃至衰竭。如果间充质干细胞转化为肿瘤相关成纤维细胞，甚至能够在体内明显促进肿瘤的生长和转移。

因此，MSCs分化为成纤维细胞的风险极大地限制MSCs在临床治疗中的应用。本领域亟待提供一种抑制MSCs向成纤维细胞分化的方法，从而消除MSCs在临床治疗方面的副作用。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种抑制MSCs成纤维分化的方法，所述方法能够有效抑制MSCs向成纤维细胞分化。

本发明的第二目的在于提供一种由上述方法获得的MSCs，所述MSCs没有分化为成纤维细胞的风险。

本发明的第三目的在于提供一种分离的DNA片段，所述DNA片段能够有效地抑制MSCs中Axin1基因的表达。

本发明的第四目的在于提供一种抑制MSCs中基因β-Catenin、GSK-3β和JNK的表达的方法，所述方法能够有效抑制上述基因的表达从而抑制MSCs向成纤维细胞分化。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种抑制MSCs成纤维分化的方法，所述方法包括沉默MSCs中Axin1基因的表达的步骤。