[发明专利]胚培养基和胚培养方法以及胚培养方法的应用

说明书

本发明提供了一种胚培养基和胚培养方法以及胚培养方法的应用，涉及植物工程的技术领域。本发明提供的胚培养基通过不断的尝试和改良而确定，本发明提供的胚培养基结合本发明提供的胚培养方法，能够有效提高胚的成熟率，尤其是能够提高高加索三叶草与白三叶杂交F₁代杂交胚的成熟率，有利于高加索三叶草与白三叶的远缘杂交育种。

技术领域

本发明涉及植物工程技术领域，尤其是涉及一种胚培养基和胚培养方法以及胚培养方法的应用。

背景技术

胚，是由受精卵发育而成的新一代植物体的雏型，是种子重要的组成部分。由胚发育最终形成幼苗的过程，是得到新一代植株非常重要的一个过程。然而对于某些植物，胚的成熟率极低，很难发育成幼苗。因此，在这种情况下，就需要人为进行胚的离体培养，以提高胚的成熟率。目前常用的胚离体培养基，大多含有激素，对于植株的正常发育会产生一定的影响。因此，找到合适的胚离体培养基以提高胚的成熟率，具有重要的指导意义。

除了胚自然成熟率低现象的存在，在植物远缘杂交育种中，最常面临的问题就是杂种胚败育，其成熟率很低或难以发育成幼苗，导致最终不能获得杂交种。以三叶草属牧草为例，三叶草属牧草具有品质优良、营养丰富、固氮能力强等多种优点，尤以具有强抗逆性的六倍体高加索三叶草品种，和具有强固氮能力的四倍体大兴安岭野生白三叶为例，为了培育出结合双亲优良性状的三叶草新品种，以高加索三叶草为母本、白三叶为父本进行远缘杂交，但人工杂交后，其F₁代杂交胚的成熟率极低，很难得到成熟幼苗。因此，通过培养基的改良以提高高加索三叶草与白三叶杂交F₁代杂交胚的成熟率，获得杂种F₁代植株，具有重要的意义。

因此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种胚离体培养基，本发明的第二个目的在于提供一种胚培养方法，本发明的第三个目的在于提供所述胚培养方法的应用，以缓解现有技术中存在的胚成熟率低的技术问题。

本发明提供的一种胚培养基，所述胚培养基包括：KCl，终浓度为58.5-71.5mg/L；KNO₃，终浓度为72-88mg/L；Ca(NO₃)·4H₂O，终浓度为270-330mg/L；MgSO₄·7H₂O，终浓度为648-792mg/L；NaH₂PO₄·H₂O，终浓度为14.85-18.15mg/L；Na₂SO₄，终浓度为180-220mg/L；ZnSO₄·7H₂O，终浓度为2.7-3.3mg/L；KI，终浓度为0.747-0.913mg/L；H₃BO₃，终浓度为1.35-1.65mg/L；Na₂MoO₄·2H₂O，终浓度为0.225-0.275mg/L；CoCl₂·6H₂O，终浓度为0.0225-0.0275mg/L；CuSO₄·5H₂O，终浓度为0.0225-0.0275mg/L；肌醇，终浓度为90-110mg/L；VB5，终浓度为4.5-5.5mg/L；VB1，终浓度为0.9-1.1mg/L；VB6，终浓度为0.9-1.1mg/L；CH，终浓度为2.25-2.75mg/L；泛酸钙，终浓度为0.09-0.11mg/L；FeSO₄·7H₂O，终浓度为25.065-30.635mg/L以及Na₂EDTA·2H₂O，终浓度为33.525-40.975mg/L。