[发明专利]质粒组合物、DNAPK基因敲除大鼠模型的构建方法及应用有效
申请号: | 201710265724.2 | 申请日: | 2017-04-21 |
公开(公告)号: | CN108728487B | 公开(公告)日: | 2020-07-14 |
发明(设计)人: | 沈月雷;白阳;张美玲;周小飞;姚佳维;苏幼红;余巧玲;杜吉超;赵会珍 | 申请(专利权)人: | 北京百奥赛图基因生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;A01K67/027 |
代理公司: | 北京悦成知识产权代理事务所(普通合伙) 11527 | 代理人: | 高艳丽;樊耀峰 |
地址: | 101111 北京市大兴区北京市北京经济*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 质粒 组合 dnapk 基因 大鼠 模型 构建 方法 应用 | ||
1.一种用于引起细胞内基因组结构改变的质粒组合物,其特征在于,所述质粒组合物包含第一质粒和第二质粒,所述第一质粒用于产生第一多肽,所述第二质粒用于产生第二多肽;
其中所述第一多肽能够特异性识别并结合SEQ ID NO:2所示的序列或其互补序列,所述第二多肽能够特异性识别并结合SEQ ID NO:3所示的序列或其互补序列;
所述SEQ ID NO:2所示的序列和所述SEQ ID NO:3所示的序列各自为源自大鼠DNAPK基因第4外显子的序列,所述大鼠DNAPK基因第4外显子具有SEQ ID NO:1所示的序列;
所述第一质粒的碱基序列如SEQ ID NO:5所示和所述第二质粒的碱基序列如SEQ IDNO:6所示。
2.一种引起细胞内基因组结构改变的方法,其特征在于,所述方法包括使用根据权利要求1所述的质粒组合物的步骤。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述方法进一步包括使所述第一质粒和所述第二质粒进行体外转录得到体外转录产物的步骤,还包括使所述体外转录产物进行翻译的步骤。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述细胞为受精卵细胞。
5.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于,所述细胞为SD大鼠原核期受精卵。
6.一种DNAPK基因敲除大鼠的构建方法,其特征在于:
所述构建方法包括使用根据权利要求1所述的质粒组合物的步骤;或者
所述构建方法包括以根据权利要求2~5任一项所述的引起细胞内基因组结构改变的方法作为其步骤。
7.根据权利要求6所述的构建方法,其特征在于,所述的构建方法进一步包括如下步骤:
使所述第一质粒和所述第二质粒转录产生相应的转录产物的步骤;
将所述转录产物引入所述大鼠原核期受精卵的细胞质或细胞核中的步骤;和
培养所述受精卵,并将所述受精卵移植进入母鼠的步骤。
8.一种DNAPK基因敲除大鼠在生物医药领域中的应用,其特征在于,所述DNAPK基因敲除大鼠通过根据权利要求6或7所述的构建方法构建获得。
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