[发明专利]发酵工艺制备溶菌酶的方法

权利要求书

1.发酵工艺制备溶菌酶的方法，包括以下步骤：取液体培养基置于三角瓶中，按1-10％v/v的接种量接入菌体种子，进行摇瓶发酵，发酵条件为20-40℃，150-300r/min，发酵培养24h后，将发酵液离心去除菌体，取上清液用硫酸铵盐析法纯化，即得溶菌酶，其特征在于，所述液体培养基包含葡萄糖、蛋白胨和表面活性剂，所述表面活性剂为浓度比为1:2-2:1的椰油脂肪酸二乙酰胺和吐温类表面活性剂的混合物，所述吐温类表面活性剂为吐温80。

2.根据权利要求1所述的制备溶菌酶的方法，其特征在于，所述葡萄糖的浓度为10g/L，所述蛋白胨的浓度为5g/L。

3.根据权利要求1所述的制备溶菌酶的方法，其特征在于，所述椰油脂肪酸二乙酰胺和吐温类表面活性剂的浓度范围均为0.5g/L-2g/L。

4.根据权利要求3所述的制备溶菌酶的方法，其特征在于，所述椰油脂肪酸二乙酰胺的浓度为1g/L，所述吐温类表面活性剂的浓度为0.5g/L。

5.根据权利要求1所述的制备溶菌酶的方法，其特征在于，所述菌体选自灰色链霉菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌或溶杆菌。

6.根据权利要求5所述的制备溶菌酶的方法，其特征在于，所述菌体选自灰色链霉菌S-35、表皮葡萄球菌K-6-W1、枯草芽孢杆菌K-77或溶杆菌S2-6b。

7.根据权利要求1所述的制备溶菌酶的方法，其特征在于，所述发酵条件为30℃，200r/min。

8.根据权利要求1所述的制备溶菌酶的方法，其特征在于，所述接种量为液体培养基4％v/v。