[发明专利]一株DSE真菌及蓝莓组培苗快速菌根化的方法

说明书

一株DSE真菌及蓝莓组培苗快速菌根化的方法，属于生物技术领域，所述菌株为R16，保藏编号为：CGMCC No.13885。本发明还建立了所述菌株与蓝莓组培苗快速菌根化的方法。该体系采用灭菌苔藓作为无菌条件下的共培养基质，DSE接种剂采用液体培养方法。与现行的采用菌块接种的方法相比，接种液体培养的菌株R16生长快，与蓝莓根菌接触充分，共培养时短，定植率高。DSE菌株R16对蓝莓组培苗生长有显著的促进作用。与未接种对照相比，接种DSE菌的蓝莓苗生长有显著优势，叶片大而浓绿，根系发达，移栽成活率高。

技术领域

本发明属于微生物领域，具体地涉及一株DSE真菌及蓝莓组培苗快速菌根化的方法。

背景技术

深色有隔内生真菌(Dark Septate Endophytes，DSE)是一类广泛存在于植物根内，且具有深色有隔菌丝的菌根真菌。已有的研究证实，DSE与宿主互惠共生，赋予植物优良生长性状，能提高宿主抗病虫能力及在胁迫环境中的抗逆性。

蓝莓(Vaccinium spp.)又称越橘，为杜鹃花科越橘属植物，是具有较高经济价值和广阔开发前景的新兴果树树种，栽培面积的扩大对蓝莓苗的市场需求也日益增大。蓝莓苗的繁育主要采用硬枝扦插和组织培养等方法。其中，组织培养方法繁殖速度快，适宜于优良品种的无病毒工厂化苗木繁育。目前，尽管许多蓝莓品种的组培快繁体系已建立，但仍存在幼苗生根困难，叶片发黄，移栽成活率低等问题，成为制约蓝莓苗规模化组培快繁的主要障碍。对蓝莓苗进行有益促生菌的接种，快速实现其菌根化是克服蓝莓组培苗生长缓慢，提高成活率的一个有效措施。

目前，已有学者对DSE与植物在无菌条件下的共生培养体系开展研究。现行的方法多是采用改良的植物固体培养基，接入的DSE菌种是菌块或菌片的形式。但该方法在实施过程中往往出现DSE菌片在植物培养基中生长缓慢，植物根系不能与DSE充分接触，从而造成共培养周期长、侵染效率低的情况。因此，上述方法不适于根系纤细不发达植物如蓝莓与DSE的共生培养。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供一株DSE真菌及蓝莓组培苗快速菌根化的方法，所述菌株为R16，其分类命名为Tricladium splendens，已在中国普通微生物菌种保藏管理中心(China General Microbiological Culture Collection Center, CGMCC)保藏，其保藏编号为：CGMCC No.13885。该菌株菌落为灰白色，绒毡状，边缘光滑，菌落背面灰黄色。菌丝分叉，由主轴从不同平面发出2个侧枝，顶部渐尖，菌丝内有隔，能产生孢子。

本发明为解决蓝莓组培快繁中幼苗生根率低，生长缓慢，移栽成活率低等问题提供了有效途径；稳定高效的DSE菌与蓝莓组培苗共生体系为研究DSE与蓝莓互作机理提供了理想实验系统，也为建立DSE与其它植物尤其是根系纤细植物的共生体系提供借鉴。

本发明是通过如下技术方案来实现的：

一株DSE真菌，所述菌株为R16，其分类命名为Tricladium splendens；该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，其保藏编号为：CGMCCNo.13885。

本发明还提供一种所述菌株与蓝莓组培苗快速菌根化的方法，所述方法的具体步骤如下:

1)蓝莓苗的培养

选取生长状态良好，株高4-5cm的蓝莓组培苗进行快速繁殖，选取繁殖的高 5-7cm生长状态良好的蓝莓组培苗进行生根培养；

2)DSE接种剂的制备