[发明专利]一株黄绿木霉T-321010菌株及其培养方法与应用

权利要求书

1.一株黄绿木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株，2011年12月22日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC No.5638，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

2.权利要求1所述黄绿木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌剂的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)将黄绿木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株接种于PDA固体培养基中，在25～27℃活化培养6d～9d，制得活化菌株；

(2)将步骤(1)制得的活化菌株接种至PD液体培养基中，在25～27℃摇瓶培养36h～48h，制得液体种子；

(3)将步骤(2)制得的液体种子接种至液体发酵培养基中，在25～27℃的条件下发酵培养，制得发酵液；

(4)将步骤(3)制得发酵液按质量百分比10％～30％的比例接种于固体发酵培养基中，在20℃～30℃、含水量50％～60％、空气相对湿度80％～100％的条件下，固体发酵72h～96h；然后经干燥至含水量为5～10％，即得。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中的液体发酵培养基，每升组分如下：

玉米粉12～18g，葡萄糖4～6g，豆粉4～6g，磷酸氢二钾0.8～1.2g，碳酸钙4～6g，水定容至1L，pH6.0。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，发酵培养包括三级液体发酵，具体步骤如下：

a、将步骤(2)制得的液体种子按体积比1％～5％的比例接种至液体发酵培养基中，在25～27℃的条件下，进行一级种子发酵培养36h～48h，制得一级种子液；

b、将一级种子液按体积比3％～8％接种至液体发酵培养基中，在25～27℃的条件下，进行二级发酵培养30h～40h，制得二级发酵液；

c、将二级发酵液按体积比5％～10％接种至液体发酵培养基中，在25～27℃、通气量1：0.6-0.8、搅拌速度为200r/min的条件下，进行三级发酵培养30h～40h，制得发酵液。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中，固体发酵培养基按如下方法制备：

将麦麸65～75份、作物秸秆粉末25～35份混合后，加入混合物质量1.1～1.3倍的水，搅拌均匀，调pH 6～6.5，即得。

6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中，干燥先进行通风晾干24～48h；然后去除培养基上的覆盖物，再自然晾干24～48h；然后翻倒培养基再33～37℃条件下，干燥至含水量5～10％。

7.权利要求1所述黄绿木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌株在制备生防菌剂中的应用。

8.一种农用复合剂，其特征在于，包括权利要求2制备的黄绿木霉(Trichoderma sp.)T-321010菌剂0.5～45份，复配物55～99.5份，均为重量份；

所述复配物选自可溶性甲壳素、豆粕、甲基托布津、农家肥或黄腐酸钾。