[发明专利]一株抗马布特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株GZ03及其应用

说明书

本发明公开了一株抗马布特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株GZ03及其应用，属于食品安全免疫学检测领域。本发明的抗马布特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株GZ03，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，保藏编号为CGMCC No.13091。此细胞株分泌的单克隆抗体，对马布特罗具有较好的特异性和检测灵敏度（IC₅₀值为0.41ng/mL），可以用于食品中马布特罗的残留检测。

技术领域

本发明一株抗马布特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株GZ03及其应用，属于食品安全免疫学检测领域，涉及杂交瘤细胞株GZ03及其产生的抗马布特罗单克隆抗体。

背景技术

β-肾上腺受体兴奋剂是一类能够促进瘦肉生长的饲料添加剂，包括盐酸克伦特罗、溴布特罗、马布特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、盐酸多巴胺、硫酸特布他林、苯乙醇胺A、班布特罗、盐酸齐帕特罗、盐酸氯丙那林、西布特罗、酒石酸阿福特罗、富马酸福莫特罗等15种药物。其中盐酸克伦特罗最早被用作饲料添加剂，适用范围也最为广泛。马布特罗（Mab）的化学结构与克伦特罗（cl）非常相似，很有可能成为克伦特罗的替代品。β-肾上腺受体兴奋剂这类药物在医学上具有松弛支气管平滑肌，降低血管通透性，发挥平喘的作用，也可以加强心肌收缩性，加快心律，提高心脏的兴奋性，若将这类药物加入到饲料中去，则能够显著提高猪、牛、羊等牲畜的瘦肉生长率，从而使体重也得以增加。且这类药物性质稳定、不易破坏，能通过进食摄取危害人体健康，导致明显的生理毒性，例如心悸、战栗、恶心呕吐、头晕目眩、神经过敏、血管舒张、心跳加速等，特别是对三高病人和甲亢患者有较为明显的危害，严重的甚至有可能导致死亡。欧盟、美国、中国等众多国家和地区均相应立法严令禁止使用β-激动剂作为动物饲料添加剂。我国农业部也先后颁布了176号、193号、235号、1519号等一系列公告，明确提出不得将以上 15 种β-肾上腺受体兴奋剂作为动物饲料及其饮用水的添加剂。

目前检测溴布特罗、克伦特罗和马布特罗的方法主要是气相色谱法（GC），液相色谱法（HPLC），分光光度法、分子印迹法、毛细管电泳、气质联用法、电化学免疫传感器等方法，但是这些方法存在操作繁琐，耗时，费用比较贵等缺点，不能实现大量样品的快速检测。因此建立一种快速简便的检测方法具有重要意义。酶联免疫法（ELISA）是一种极为高效、敏感、快速的检测方法，检测时对样本的纯度要求不高而且操作简便，适用于大量样本的现场快速检测。然而得到高特异性和高灵敏度的单克隆单体是免疫学检测的前提，其中人工抗原的合成是其中重要的一步。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对马布特罗具有较好特异性和检测灵敏度的单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备方法。

本发明提供一种抗马布特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株，由该细胞株制备的抗体对马布特罗具有较好特异性和检测灵敏度，可以用来建立马布特罗的免疫学检测方法。

本发明的技术方案：一株抗马布特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株GZ03，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，保藏编号为CGMCC No.13091。

抗马布特罗单克隆抗体，它由所述保藏编号为CGMCC No.13091的抗马布特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株GZ03分泌产生。

抗马布特罗单克隆抗体的应用，可用于食品中马布特罗的残留检测。

本发明提供的细胞株GZ03的制备基本步骤为：