[发明专利]一种秋石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明提供一种秋石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法，是以秋石斛兰的新芽为外植体，采用丛生芽诱导途径，通过芽长芽达到快速繁殖目的，包括以下步骤：外植体的选择和消毒、丛生芽的诱导培养、丛生芽的增殖培养、生根培养、及试管苗移栽。采用本发明方法仅需5至6个月就能获得秋石斛兰种苗；繁殖过程中不仅诱导率高，而且增殖后无需进行壮苗培养即可进行后续的生根培养，简化了培养环节、降低了培养成本，即增殖效率高，进而提高了整个种苗培养的效率；另外，本发明培养的试管苗健壮、根系发达，且通过驯化炼苗，其环境适应能力较强，从而提高了种苗移栽成活率。

【技术领域】

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种秋石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法。

【背景技术】

秋石斛兰(Dendrobium spp.)为兰科石斛属常绿类石斛，又称蝴蝶石斛、杜兰、石斛、石兰等。多是以原产于新几内亚的热带原生种蝴蝶石解(Dendrobium Phalaenopsis)为亲本育成的杂交品种。秋石斛兰是是近几年在中国插花市场上流行的花卉，种类繁多，花形花姿优美，色彩艳丽，花期长，具有较高的观赏价值，在国内切花和盆花的市场需求量逐年增加，对优质种苗的需求迫切。

近年我国大陆引进了不少秋石斛兰品种，但是种苗生产主要靠分株繁殖，繁殖速度慢，而且病毒不断积累严重影响品质，难以满足市场需求。利用植物组织培养技术可以实现秋石斛兰种苗快速繁殖，从而近年愈来愈受到从业人员的重视。

2002年黄志明等曾报道蝴蝶石斛兰以嫩芽茎尖为外植体，先诱导无菌球胚，后经球胚增殖与芽分化、壮苗等环节建立了育苗技术[黄志明，林庆良，佘慧敏.蝴蝶石斛兰工厂化育苗技术的研究[J].莆田学院学报，2002，9(3)：22-26]。罗岚等曾分别在2003年、2004年报道过以秋石解兰小苗的茎尖为材料，先诱导原球茎，后经原球茎增殖、芽分化、生根等环节建立了离体繁殖技术[罗岚，关仕港，刘建昌，林少娟.秋石解兰离体快速繁殖研究[J].佛山科学技术学院学报(自然科学版)，2004，22(2)：69-71；罗岚.秋石解原球茎增殖培养[J].花木盆景，2003，6(8)：4-7]。2009年陈亚鸿等曾报道秋石斛兰梦系列品种在原球茎增殖、芽分化过程通过培养基中添加活性炭和胰蛋白胨降低褐化率的研究，并筛选出适宜的培养基配方[陈亚，洪磊，陈雄庭.减少秋石斛在组织培养中的褐化研究[J].现代农业科学，2009，16(3)：44-48]。

以上文献均提供了秋石斛兰原球茎诱导途径繁殖技术，但原球茎诱导途径要经历脱分化再分化培养过程，历时较长，成苗率较低，这对秋石斛兰优质种苗的获得极为不利。

为了解决原球茎诱导途径存在的问题，申请号为CN200410077729.5、名称为“秋石斛兰优质种苗组织培养快速繁殖方法”的中国专利中，提出了以秋石斛兰种质新芽为外植体，采用培养基进行丛生芽增殖并获得种苗；其虽然建立了秋石斛兰的组织培养繁殖技术，但增殖效率与移栽成活率仍然不够理想，并存在着操作过程相对较为繁复的缺陷。

由鉴于此，研究或优化，以期得到一种操作过程相对便捷、培养效率与移栽成活率均较为理想的秋石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法，是从业人员所迫切希望地。

【发明内容】

本发明所要解决的技术问题在于提供一种秋石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法，不仅培养环节简化即操作过程相对便捷，而且培养效率与移栽成活率均较为理想。

本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：一种秋石斛兰种苗的组织培养快速繁殖方法，该方法包括如下具体操作步骤：