[发明专利]一种载抗骨吸收药物纳米颗粒脂‑聚合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，更具体的说是涉及一种载抗骨吸收药物纳米颗粒脂-聚合物的制备方法。

背景技术

骨质疏松症是一种渐进性的骨吸收和骨形成失衡的系统性骨疾病，骨质疏松症发生的细胞学基础是相对较弱的成骨细胞活性和/或较强的破骨细胞活性，导致了骨代谢失衡。目前的骨质疏松治疗药物可以分为两大类，抗骨吸收药物和促骨合成药物，抗骨吸收药物的主要作用机理是以破骨细胞为靶标，抑制病理性骨吸收。而促骨合成药物以成骨细胞为靶标，主要促进骨合成代谢和骨形成，使骨容量和骨密度增加。然而，大多数抗骨吸收药物有抑制骨质合成，促骨合成药有非特异性促进骨吸收的副作用。为了获得更好的疗效，一些学者也尝试联合应用抗骨吸收药和促骨合成药物，然而联合用药并不一定比单一药物具有更好的疗效，产生这种现象的原因是：不管是促骨合成药物还是抗骨质吸收药物，药物在骨组织内均是非特异性分布，药物可以同时作用于成骨细胞和破骨细胞，不可避免地带来副作用。目前的骨靶向药物传递系统仅仅能实现骨组织靶向，而不能实现药物在骨组织内精准的细胞靶向传递。

骨的吸收和重建是一个动态平衡的过程，骨改建过程发生于所有骨的基本多细胞单位BMU中，包括活化、骨吸收、反转和骨形成四个不同阶段并不断循环发生，从而在BMU中形成明显的骨吸收区和骨形成区。成骨细胞和破骨细胞在BMU中的空间分布明显不同。在骨吸收区，大量破骨细胞附着于成熟骨表面使骨溶解；在骨形成区，成骨细胞成为主导细胞并形成新骨。在骨吸收区均为成熟骨质，矿化程度高，羟基磷灰石结晶度高；而在骨形成区为新生骨质，矿化程度低，羟基磷灰石结晶度低。实验天冬氨酸八肽可以优先吸附高结晶度羟基磷灰石而不是低结晶度羟基磷灰石，因此，通过天冬氨酸八肽的引导，骨吸收抑制药物可以特异性作用于骨吸收区集聚的破骨细胞，因此，天冬氨酸八肽可以作为特异性靶向分子，实现药物的细胞靶向传递。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种载抗骨吸收药物纳米颗粒脂-聚合物的制备方法，使抗骨吸收药物能够特异性作用于骨吸收区集聚的破骨细胞，可以大大减少抗骨吸收药物抑制骨质合成的副作用。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：一种载抗骨吸收药物纳米颗粒脂-聚合物的制备方法，包括如下具体步骤：

步骤一、采用多肽固相合成法制备D8-C；

步骤二、在脂质体上外接D8-C，得到D8-C-脂质体；

步骤三、以抗骨吸收药物、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、卵磷脂和D8-C-脂质体为原料制备载抗骨吸收药物纳米颗粒脂-聚合物。

作为本发明的进一步改进，所述脂质体为二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺共聚、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-琥珀酰亚胺共聚、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-硅烷共聚、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-氨基共聚或二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇共聚中的一种。

作为本发明的进一步改进，所述步骤二中合成D8-C-脂质体的具体步骤如下：

采用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺作为偶联试剂活化D8-C羧基端3-4h，再加入脂质体，在室温下混合反应12-24h，透析，冻干，待用。

作为本发明的进一步改进，所述D8-C与脂质体的质量比为1：10-1：20。

作为本发明的进一步改进，所述步骤三的具体步骤如下：

a、将9-12mg卵磷脂、4-6mgD8-C-脂质体溶于10-25mL质量浓度3-6％的乙醇水溶液中得到A溶液；

b、将抗骨吸收药物加入水或乙腈中混合均匀，然后倒入A溶液中并混合均匀得到B溶液，使B溶液中抗骨吸收药物的浓度为200-400ug/ml；

c、将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于质量分数为80％的乙腈水溶液中得到浓度为2mg/mL的C溶液，将20-30mL C溶液加入B溶液中混合均匀得到D溶液；

d、将D溶液用超声破碎仪超声5-10min，期间逐滴加完毕5-15mL C溶液；

e、收集步骤d得到的超声后的混合液于10kDa的超滤管内离心超滤三次，即得载抗骨吸收药物纳米颗粒脂-聚合物。

作为本发明的进一步改进，步骤a中向A溶液中加入5-10mL浓度为40-80mg/mL的蔗糖、甘露糖、人血蛋白或明胶中的一种作为保护剂。

作为本发明的进一步改进，所述卵磷脂为大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂和氢化蛋黄卵磷脂中的一种或几种。