[发明专利]一种乳制品中耐热菌的检测方法

权利要求书

1.一种乳制品中耐热菌的检测方法，其特征在于，该方法包括如下步骤，(1)将乳制品加热，分离出耐热菌；

(2)培养计数步骤(1)分离出的耐热菌；

(3)选取步骤(2)中形态典型的菌落划线分离培养；

(4)分别对培养出的耐热菌提取DNA，对提取出的DNA采用PCR测序检测出耐热菌。

2.根据权利要求1所述的乳制品中耐热菌的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中对乳制品加热的温度为80-100℃、加热时间为5-20mi n。

3.根据权利要求1所述的乳制品中耐热菌的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中采用LB固体培养基培养耐热菌。

4.根据权利要求1所述的乳制品中耐热菌的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中分离培养时所用的培养基为LB固体培养基。

5.根据权利要求1所述的乳制品中耐热菌的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中对耐热菌DNA测序的方法为，将提取的耐热菌DNA作为模板，通过PCR步移方法获得16SrRNA上游序列，再采用PCR测序。

6.根据权利要求1所述的乳制品中耐热菌的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中PCR测序为95℃预变性5mi n，35个循环：95℃30s，55℃30s，72℃延伸1mi n；最后72℃延伸5mi n。

7.根据权利要求1所述的乳制品中耐热菌的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中对提取出的DNA采用PCR测序，检测耐热菌的方法为，对PCR产物割胶纯化、测序，将所测得的序列在NCB I基因数据库中做BLAST，对检测出的耐热菌鉴定。