[发明专利]一种高定植的微生物制剂及其应用

说明书

本发明公开了了公开一种高定植的微生物制剂，其包括CGMCC编号11870的耐久肠球菌CR‑29(Enterococcus durans CR‑29)和CGMCC编号11869的肠膜明串珠菌肠膜亚种菌SR‑19(Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides SR‑19)。还公开了高定植的微生物制剂在制备调整肠道微生物菌群制剂、在制备预防和/或治疗肠道致病菌中的应用。

技术领域

本发明属于益生菌领域，具体涉及一种高定植的微生物制剂及其应用。

背景技术

肠道内细菌从来源上分，有原籍菌和过路菌两种。前者并非由口摄入，在肠道内保持稳定的群体；而后者则由口摄入并经胃肠道，原籍菌是使过路菌不能定殖的因素。胃肠道的原籍菌群能抑制其它外来微生物在肠道中定殖或增殖，这就是定殖抗力，也称竞争排斥。这种定殖抗力的产生是因为体内微生物与致病菌竞争肠道上皮的吸附位点而产生的。如果这些吸附位点被较多有益微生物所占据，病原微生物就会被排斥。

阻止病原菌的定殖和侵入，如阻止沙门氏菌对宿主的感染。这种豁附定植可能是因为益生菌菌表面有能与肠粘膜细胞牢固结合的特异性物质，推测可能是脂磷壁酸或肽聚糖，或细胞表面层蛋白，或者其中二者，或三者全部。这些特异性物质被称为粘附素，乳酸菌通过粘附素与肠粘膜紧密结合，在肠粘膜表面定殖占位，是形成生理屏障的主要组成部分。该屏障可以抵御外来细菌的入侵，维持肠道内微生态平衡。研究益生菌的定殖抗力与生态占位，对益生菌在人体能否发挥出应有作用至关重要。

近年来，益生菌的理论与应用得到迅猛发展。而利用生物之间天然互惠共生现象发展多种微生物的混合培养具有广阔的应用前景，也是当下研究相对不足领域之一。天然或人工混合共生体系是靠原始协同、互惠共生和偏利共生来维持稳定状态，微生物菌群中存在的拮抗与互助是群落的重要自稳机制。人体的肠道菌群即是一个巨大的微生物共生平衡体系，其中包括人体与肠道菌群的互惠共生，原核生物与真核生物的共生，细菌与细菌之间的共生等，而天然的益生菌共生体制剂在人体微生态环境中具有有更大的缓冲能力与环境适应能力，其中在医药与食品领域人工的复合微生态制剂以使用超过百年。目前，尚对具有协同关系菌株的筛选和组合缺乏有效的方法与理论指导，同时，益生菌剂组方及其比例关系以便提高其功能而缺乏理论依据。

发明内容

本发明的发明人经过不断实验，令人惊喜的发现了一种高定植的益生菌共生体，其在肠道定植方面产生了预料不到的效应，本发明即是基于以上发现而完成。

本发明的发明人在传统的民族乳制品中筛选出一对益生菌共生体肠膜明串株菌SR-19与耐久肠球菌CR-29，并对其互惠共生作用以及该益生菌共生体对其他人体肠道益生菌的促进生长能力进行研究。

本发明的第一个方面在于公开一种高定植的微生物制剂，其包括CGMCC编号11870的耐久肠球菌CR-29(Enterococcus durans CR-29)和CGMCC编号11869的肠膜明串珠菌肠膜亚种菌SR-19(Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides SR-19)。

优选的，所述一种高定植的微生物制剂中，耐久肠球菌CR-29与肠膜明串珠菌肠膜亚种菌SR-19的cfu/g比例为1:10-10:1。

本发明的第二个方面在于公开一种制备第一方面高定植的微生物制剂的培养方法，

采用液体培养基，肠膜明串珠菌肠膜亚种均SR-19与耐久肠球菌CR-29的接种量分别为5％与7％，初始pH6.8；

初始培养温度为44℃(1.0-1.5小时)；中段培养温度为42℃(2.0-2.5小时)，发酵中段为pH5.9；末段培养温度为38℃(1.5-2.0小时)；

振荡频率140r/min的条件下培养，培养4h后添加补充营养物质继续培养，至活菌数不小于1010cfu/mL收获；