[发明专利]一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法

权利要求书

1.一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于，其包括如下具体步骤：

（1）利用茶渣制备发酵液：将茶渣清洗后按照固液比1:10与水混合榨汁，高速打碎得茶渣浆液，添加无机盐，调节pH为4.0-6.0，获得以茶渣浆为主成分的发酵培养基，装入三角瓶中，121 ℃灭菌20-30 min，自然冷却到20-30 ℃备用；

（2）茶渣糖化液的制备：在步骤（1）制备的茶渣发酵培养基中接种纤维素降解菌，进行纤维素糖化水解，得到茶渣糖化液；其具体工艺为：将经活化培养的纤维素降解菌接入步骤（1）所述三角瓶中进行糖化水解；

（3）发酵培养基的制备：将上述茶渣糖化液作为培养基碳源，补加氮源和磷源，调节pH为4.0-6.0，配制成发酵培养基，置于三角瓶中，灭菌备用；

（4）发酵制备细菌纤维素：接入细菌纤维素生产菌株的种子液，经过3-25天发酵制得细菌纤维素。

2.根据权利要求1所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（1）中的茶渣为茶叶加工生产过程中废弃的茶渣。

3.根据权利要求1所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（1）中的无机盐为KH₂PO₄、K₂HPO₄、NaCl、MgSO₄、ZnSO₄、FeCl₃中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（2）中的纤维素降解菌为噬纤维菌属（Cytophaga）、芽孢杆菌属（Bacillus）、热酸菌属（Acidothermus）、热杆菌属（Caldibacillus）、纤维弧菌属（Cellvlbrio）、假单胞菌属（Pseudomonas）和欧文菌属（Erwinia）中一种或几种。

5.根据权利要求1所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（2）中的糖化水解条件为30-45℃，转速120-180 rpm的条件下糖化水解36-120 h。

6.根据权利要求1所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（3）中的茶渣糖化液首先补加适量氮源和磷源，调节pH，置于三角瓶中，121 ℃灭菌20-30 min，冷却至室温后，接入细菌纤维素生产菌株的种子液，采用先在120-240 rpm转速下振荡培养1~3天，再静置培养3~20天的动静结合发酵形式制得细菌纤维素。

7.根据权利要求1或6所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（3）中的氮源为0.1-1.0 wt%的酵母浸膏和0.1-0.5 wt%的胰蛋白胨；或者为0.1-2.0 wt%的硫酸铵或玉米浆或麦芽汁；所述步骤（3）中的磷源为0.1-1.0 wt%的KH₂PO₄、K₂HPO₄或NaH₂PO₄或Na₂HPO₄。

8.根据权利要求1所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（4）中发酵条件20-30 ℃，在120-240 rpm转速下动态振荡培养1-3天，再静置培养3-20天。

9.根据权利要求1所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（4）中的细菌纤维素生产菌株为醋酸菌属、葡萄糖酸杆菌属、葡糖酸醋杆菌属、葡萄糖氧化杆菌、根瘤菌属、八叠球菌属、假单胞菌属、无色杆菌属、产碱菌属、气杆菌属、固氮菌属、土壤杆菌属、洋葱假单胞菌属、空肠弯曲菌、木葡糖酸醋杆菌中的一种或几种。

10.根据权利要求1所述的一种利用茶渣作为碳源制备细菌纤维素的方法，其特征在于：所述步骤（4）中细菌纤维素生产菌株的接种量为 3-15%vol。