[发明专利]一种中药青藤的组培快繁方法

说明书

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种中药青藤的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取青藤的外植体、外植体诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽；所述的外植体诱导培养操作的外植体诱导培养基包括：B5培养基+1.0～3.0mg/L 6‑BA+0.5～1.0mg/L NAA+0.05～0.1mg/L GA3+25～30g/L蔗糖+3.5～4.0g/L琼脂+0.5～1.0g/L活性炭，外植体诱导培养基pH为5.4～5.8，本发明选择青藤带节茎段为外植体，经诱导、增殖、生根、炼苗以及移栽等步骤，其诱导率达到了89％以上，成活率达到了90％以上，实现了中药青藤的组培快繁，从而实现了本发明的目的。

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种中药青藤的组培快繁方法。

背景技术

中药青藤(Sinomenium acutum)，又名青风藤、寻风藤、扶风藤、枫风藤等，是防已科防已属植物的干燥根茎，其富含具青藤碱、双青藤碱、四氢表小粟碱、尖防己碱、土藤碱、木兰碱、异青藤碱、尖防己定碱、白兰花碱等，有通络、止痛、祛风湿功效，常用于风湿及类风湿性关节炎、关节肿大、肢体疼痛、麻木等疾病的治疗。作为一种具有独特药效的中药，在民间应用青藤或其复方内服或外用治疗风湿性疾病已有一千多年的历史。由于其对风湿性疾病具有良好的疗效，目前已将其应用于中成药制剂，如正清风痛宁注射液、正清风痛宁缓释片、风湿止痛药酒、正清风痛宁片、芪麝颈康丸、追风活络胶囊等。

目前青藤处于野生状态，但由于药农无序采挖，其野生资源锐减，因此人工栽培青藤显得十分迫切！青藤可通过种子、扦插、压条等方式繁殖，但均存在周期长、繁殖系数低下等缺点，限制了青藤种苗的生产。因此有必要建立青藤的组培快繁体系，为青藤的人工规模化种植提供优质种苗。本发明选择青藤带节茎段为外植体，经诱导、增殖、生根、炼苗以及移栽等步骤，建立了中药青藤的组培快速繁殖体系。本发明具有周期短、成本低廉、繁殖系数高等特点，可直接用于青藤种苗的工厂化生产，对于促进中药青藤的植物资源开发具有重要的现实意义。

至目前为止，国内外尚未有青藤组织培养技术的报道，也未有青藤组培快繁专利的申请。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药青藤的组培快繁方法，本发明选择青藤带节茎段为外植体，经诱导、增殖、生根、炼苗以及移栽等步骤，其诱导率达到了89％以上，成活率达到了90％以上，实现了中药青藤的组培快繁，从而实现了本发明的目的。

本发明提供的技术方案为：一种中药青藤的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取青藤的外植体、外植体诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽；

所述的外植体诱导培养操作的外植体诱导培养基包括：B5培养基、1.0～3.0mg/L6-BA、0.5～1.0mg/LNAA、0.05～0.1mg/LGA3、25～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.5～1.0g/L活性炭，外植体诱导培养基pH为5.4～5.8。

在上述的中药青藤的组培快繁方法中，所述的外植体诱导培养操作的方法为：将采集得到的作为外植体的青藤的带节藤茎消毒后剪切成2.0～2.5cm的带节藤茎并接种到诱导培养基中，置于25～28℃进行全暗培养40～60天即可诱导形成不定芽。

在上述的中药青藤的组培快繁方法中，所述的增殖培养操作所用到的增殖培养基包括：MS培养基、MS培养基、3.0～5.0mg/L 6-BA、0.5～1.0mg/LNAA、20～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.1～0.5g/L活性炭，增殖培养基pH为5.4～5.8。

在上述的中药青藤的组培快繁方法中，所述的增殖培养操作具体为：将外植体诱导培养操作得到的不定芽切成长1.5～2.0cm的茎段并接种到增殖培养基中培养30～40天即可实现不定芽的增殖。