[发明专利]一种基于胶体金法检测尿液中HIV（1+2）抗体试剂

权利要求书

1.一种基于胶体金法检测尿液中HIV(1+2)抗体试剂的制备方法，其特征在于，以胶体金标记的SPA偶联抗人IgG抗体制备胶体金结合物垫，作为显色探针，在硝酸纤维素膜上混合包被gp41抗原和gp36抗原，作为检测HIV 1型抗体和HIV 2型抗体的检测线。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，胶体金结合物垫的制备方法如下：

1)标记SPA，以0.2M碳酸钾调节胶体金PH在8.2左右，10～30μg/ml金的比例加入SPA,反应30～60分钟后，以BSA或PEG进行封闭，封闭液的终浓度1～10mg/ml，10000rpm离心10～60分钟，弃上清，沉淀用含有2mg/ml BSA的10mM Tris-Hcl(pH8.2)缓冲液的复溶至原体积。

2)金标SPA偶联抗人IgG抗体，在上述复溶后的金标SPA溶液中，每毫升溶液中加入抗人IgG抗体0.1～10μg，反应60min，10000rpm离心10～60分钟，弃上清，沉淀用含0.5％BSA、5％蔗糖、0.1％Triton X-100、0.03％proclin-300的10mM Tris-Hcl(pH8.2)的缓冲液复溶至原体积。

3)冷冻干燥，将上述金标溶液铺金后，-50℃预冻2小时后，抽真空进行升华冻干，制备胶体金结合物垫。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，其中的胶体金结合物垫，通过金标SPA偶联抗人IgG抗体，使抗人IgG抗体的有序性增强，即Fab端一致向外，增加有效抗体的数量，增强其结合尿液中游离蛋白的能力，同时，通过金标SPA偶联抗人IgG，延长金标探针的手臂，增强其反应能力，提升产品的灵敏度。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在硝酸纤维素膜上混合包被的gp41抗原浓度为0.5～2.5mg/ml,gp36抗原浓度为0.1～0.5mg/ml。

5.一种检测体系，包括SPA，胶体金，BSA，PEG，Tris-Hcl缓冲液，抗人IgG，蔗糖，Triton X-100，proclin-300。

6.权利要求5的检测体系，为检测卡，包括硝酸纤维素膜、金标垫，吸水纸、胶板和塑料卡壳，检测卡设有检测线显示部分和样本加样孔，其中的金标垫按照权利要求2的方法制备。