[发明专利]一种海藻酸钙多相微载体的制备方法

说明书

本发明公开了一种海藻酸钙多相微载体的制备方法。所述方法采用静电喷射技术，将海藻酸钠水溶液在静电作用下双针头并喷形成均匀液滴，液滴进入到氯化钙溶液中，制得两相凝胶微球。本发明的制备方法简单，制备的微球粒径在150‑250μm，可控性较强。海藻酸钠具有良好的生物安全性、生物相容性、生物降解性与可加工性。本发明方法制得的海藻酸钙多相微载体，微球两相区域能够促进细胞的功能表达，可同时担载多种细胞和多种生长因子，考察细胞的生物活性，进一步开发具有磁性、热学等性能的功能性微载体。

技术领域

本发明属于静电喷射技术领域，涉及一种海藻酸钙多相微载体的制备方法。

背景技术

细胞培养技术作为研究细胞结构和功能的基础与批量化生产商品型细胞及其产物的重要方法，作用十分关键。微载体培养兼具贴壁培养和悬浮培养的优势，具有很高的比表面积，扩散路径短，易于操作和监控等特点。国内目前常见的微载体类型有实心微载体和多孔微载体。已有的单相微载体培养极大地限制了不同细胞或生物因子等相互作用下的功能表达(周燕等.微载体培养技术的研究与进展[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,(16):2945-2948.)。将微载体培养的细胞注入生物体内时，由于体内成型困难和微球游走，其定位性与固定性不强。同时由于生物体内免疫系统的排斥，使其细胞的功能表达明显减少。另外，在选择制造微载体的生物材料时，必须考虑其是否具有良好的生物安全性、生物相容性、生物降解性与可加工性。

海藻酸钠，一种天然多糖，具有药物制剂辅料所需的稳定性、溶解性、粘性和安全性。目前海藻酸钠主要用于食品工业、制药业等，而未用于细胞培养方面，特别是多相细胞微载体的构建。

发明内容

本发明的目的是提供一种海藻酸钙多相微载体的制备方法。该方法采用电喷技术，将海藻酸钠水溶液在静电作用下双针头并喷形成均匀液滴，调控承接液氯化钙溶液的浓度，海藻酸钠液滴经螯合作用形成球状微球。本发明方法制得的微载体由两相组成，可同时担载多种细胞和多种生长因子，为细胞的共培养创造良好的条件，为组织工程、细胞治疗等奠定良好的基础。

实现本发明目的的技术解决方案是：

一种海藻酸钙多相微载体的制备方法，包括以下步骤：

采用双针头并喷的方式，设置电压为8～12kv，接收距离为10～15cm，推进速度为0.8～1.0mL/h，将质量分数为0.2～0.75％的海藻酸钠溶液进行静电喷射，喷出的液滴进入到质量分数为1.0～2.0％的氯化钙溶液中，制得海藻酸钙多相微载体。

优选地，所述的海藻酸钠溶液的质量分数为0.5％。

优选地，所述的氯化钙溶液的质量分数为1.5％。

优选地，针头直径为0.60mm。

本发明利用海藻酸钠具有形成凝胶的稳定性，采用双针头静电喷射的方法，再加以利用适宜浓度的承接液氯化钙溶液的螯合作用，形成球形水凝胶。本发明方法简单，成本低廉，反应条件温和，能够有效调控水凝胶形状、大小及其分相区。本发明的海藻酸钙微载体具有多相区域，有利于不同细胞或生物因子等相互作用下的功能表达。

附图说明

图1为海藻酸钙两相微球的示意图。

图2为海藻酸钙两相微球的光学显微镜图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明作进一步详述。

实施例1

以氯化钙及浓度为0.2％的海藻酸钠为原料制备多相微载体：

(1)配制质量分数为0.2％的海藻酸钠溶液，并在磁力搅拌下至溶液澄清均一，然后静置一夜；