[发明专利]一种沙门氏菌的快速检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及沙门氏菌的检测技术领域，尤其指一种沙门氏菌的快速检测方法。

背景技术

沙门氏菌是一种严重威胁人类及动物生命健康的人畜共患病原菌，可引起人和动物急性胃肠炎、伤寒、败血症以及肠外灶性感染等，已被FAO列为A类病原微生物。历年来，沙门氏菌引起的食物中毒常列于细菌性食物中毒的榜首。我国疾病预防控制中心已将沙门氏菌列为食品中要求控制的细菌指标之一。

准确及时的检测手段是预防和控制病原微生物传播的关键。目前沙门氏菌的检测多采用传统的微生物培养的方法， 主要包括前增菌、选择性增菌、平板分离、生化试验和血清学鉴定等步骤，涉及的实验较多、操作较烦琐、检测周期较长(一般需要4～7d)、准备和收尾工作繁重，已无法满足现阶段食品中致病菌快速检测的现实需要。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种沙门氏菌的快速检测方法。

一种沙门氏菌的快速检测方法，包括以下步骤：

1.培养基配制

1）增菌培养基配制：称取 26.5 g 增菌粉末培养基，加入预热 42±1 ℃去离子水 1 L，充分溶解，备用；

2）选择性培养基配制：称取 7.5 g 选择粉末培养基，加入预热 42±1 ℃去离子水 100 mL，充分溶解，备用；

2. 无菌操作取 25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入 225 mL 预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2 min；42 ℃静止或者振荡培养 6 h，根据需要也可以延长至 24 h；取 0.1 mL 上述增菌液，加入含 1 mL 选择性培养基的 5 mL 玻璃管内，42±1 ℃继续培养 18-24 h；

3. 将培养物混合均匀，取 1 mL 到试管中沸水（100 ℃）加热 10 min，冷却至室温，用滴管滴加 3-4 滴至胶体金检测卡的样品孔，反应 5-10 min，判读结果，超过 30 min 显色无效。

进一步的，所述增菌粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：蛋白胨70～ 110份、氯化钠50～ 80份、磷酸氢二钠70～ 90份、磷酸二氢钾5～ 10份、煌绿0.06～0.08份、牛胆盐5～10份、萘啶酸0.1～0.14份、脱脂牛奶粉150～400份。

进一步的，所述选择粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：胰蛋白胨5-7.5 份，鱼粉蛋白胨2.5-7.5份，牛肉浸膏2-8份，氯化钠2.5-7.5份，磷酸氢二钠 1-2份，磷酸二氢钾6-12份，甘露醇1-3份，丙酮酸钠5-15份，阿卡波糖0.2-1份，胆盐5号1.25-5 份，硫代硫酸钠10-30份。

本发明的有益效果是：本发明提供了一种快速灵敏的检测样品中的沙门氏菌的方法，为沙门氏菌的快速定性检测提供了一种便捷有效地途径。缩短沙门氏菌检测时间，加快检测进程，缩短检测人员的劳动时间，降低劳动强度，节省水电及储存清洁等成本，提高检测效率，降低检测成本，便于现场检测，提高准确度。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：

实施例一

一种沙门氏菌的快速检测方法，包括以下步骤：

1.培养基配制

1）增菌培养基配制：称取 26.5 g 增菌粉末培养基，加入预热 42 ℃去离子水 1 L，充分溶解，备用；

2）选择性培养基配制：称取 7.5 g 选择粉末培养基，加入预热 42 ℃去离子水 100 mL，充分溶解，备用；

2. 无菌操作取 25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入 225 mL 预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2 min；42 ℃静止或者振荡培养 6 h，根据需要也可以延长至 24 h；取 0.1 mL 上述增菌液，加入含 1 mL 选择性培养基的 5 mL 玻璃管内，42 ℃继续培养 21 h；

3. 将培养物混合均匀，取 1 mL 到试管中沸水（100 ℃）加热 10 min，冷却至室温，用滴管滴加 3-4 滴至胶体金检测卡的样品孔，反应 5-10 min，判读结果，超过 30 min 显色无效。

其中，所述增菌粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：蛋白胨90份、氯化钠60份、磷酸氢二钠80份、磷酸二氢钾7份、煌绿0.07份、牛胆盐7份、萘啶酸0.12份、脱脂牛奶粉300份。