[发明专利]检测Y染色体微缺失的多重PCR引物组、试剂盒和应用有效
申请号: | 201710299012.2 | 申请日: | 2017-04-27 |
公开(公告)号: | CN107012234B | 公开(公告)日: | 2020-05-22 |
发明(设计)人: | 梅世月;孔祥东;白楠;孟静静 | 申请(专利权)人: | 郑州大学第一附属医院 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京思创大成知识产权代理有限公司 11614 | 代理人: | 张清芳 |
地址: | 450052 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 染色体 缺失 多重 pcr 引物 试剂盒 应用 | ||
1.一种检测Y染色体微缺失的多重PCR引物组,其特征在于,该多重PCR引物组包括通用引物和特异性引物,
所述通用引物具有如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的碱基序列:
正向:5’-GGTGACCAAGTTCATGCTCT-3’(SEQ ID NO:1)
反向:5’-GGTCCAGGTCACGAGATCTT-3’(SEQ ID NO:2)
其中,SEQ ID NO:1所示碱基序列的5’端标记有荧光基团;
所述特异性引物包括具有如SEQ ID NO:3~SEQ ID NO:22所示碱基序列的引物。
2.根据权利要求1所述的多重PCR引物组,其中,所述荧光基团为FAM、HEX、VIC、TET、JOE、ROX、TEXAS-RED、CY3、CY5或CY5.5。
3.根据权利要求2所述的多重PCR引物组,其中,SEQ ID NO:1~ SEQ ID NO:22的摩尔比为(2-20):(2-20):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5):(1-5)。
4.一种检测Y染色体微缺失的试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括:
如权利要求1-3中任意一项所述的多重PCR引物组;
多重PCR反应试剂。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其中,所述多重PCR反应试剂包括:MgCl2、甜菜碱、热启动Taq酶、dNTPs和PCR反应缓冲液。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其中,所述MgCl2的浓度为50-200mmol/L;所述甜菜碱的浓度为5-20 mol/L;所述dNTPs的浓度为5-20mmol/L。
7.根据权利要求4所述的试剂盒,其中,该试剂盒包括:对照DNA标本。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其中,所述DNA标本为正常男性对照标本、AZFa区缺失对照标本、AZFb区缺失对照标本和AZFc区缺失对照标本中的至少一种。
9.权利要求1-3中任意一项所述的多重PCR引物组或权利要求4-8中任意一项所述的试剂盒在制备检测Y染色体微缺失的试剂中的应用。
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