[发明专利]一种沙棘黄酮类提取物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高纯度的沙棘黄酮类提取物及其制备方法。

背景技术

沙棘，为胡颓子科多年生灌木或乔木植物沙棘Hippophae rhamnoides Linn.的果实。沙棘为药食同源植物。沙棘的根、茎、叶、花、果，特别是沙棘果实含有丰富的营养物质和生物活性物质，可以广泛应用于食品、医药、轻工、航天、农牧鱼业等国民经济的许多领域。沙棘果实入药具有止咳化痰、健胃消食、活血散瘀之功效。现代医学研究，沙棘可降低胆固醇，缓解心绞痛发作，还有防治冠状动脉粥样硬化性心脏病的作用。

沙棘果实中含有多种维生素、脂肪酸、微量元素、亚油素、沙棘黄酮、超氧化物等活性物质和人体所需的各种氨基酸。研究发现，沙棘黄酮具有增加冠状动脉血流量、降低心肌耗氧量、抑制血小板聚集、抗肿瘤、调节免疫系统、抗衰老等多种药理作用。

当前市售的沙棘黄酮含量(或称纯度)规格一般在20％～65％，含量偏低，这不利于对沙棘黄酮的进一步研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高纯度的沙棘黄酮类提取物及其制备方法。

具体地，本发明提供了一种沙棘黄酮类提取物，所述提取物中总黄酮含量为80～95％w/w。

进一步地，所述提取物中总黄酮含量为85～94％w/w；其含量更进一步可以达到89～94％。例如，本发明具体实施方式中，总黄酮含量可以达到约89％或94％。

其中，所述总黄酮含量，是以芦丁为对照品，采用ALCl₃比色法在270nm下检测得到。

本发明所述“ALCl₃比色法”，为本领域对总黄酮含量测定的常规方法，可参照一般操作规程进行。

本发明还提供了上述沙棘黄酮类提取物的制备方法，它包括如下操作步骤：

(1)将沙棘果汁，冷冻干燥得沙棘果粉，乙醇超声提取2.0～3.0h，超声功率80～100W，提取温度为50～80℃，乙醇体积分数为40～80％，料液比为3～7mL/g，提取次数为3次；

(2)取步骤(1)提取液，除去乙醇后，以水为溶媒，用苯乙烯型大孔吸附树脂进行分离，采用体积分数60-80％乙醇进行洗脱，收集乙醇洗脱液，除去乙醇，干燥，即得沙棘黄酮类提取物。

进一步地，步骤(1)中，超声提取2.0～3.0h，超声功率为100W，提取温度为65～75℃，乙醇体积分数为40～60％，料液比为5～7mL/g。

更进一步地，步骤(1)中，超声提取2.5h，超声功率为100W，提取温度为65～68℃，乙醇体积分数为54～55％，料液比为5mL/g。为了便于操作，本发明一个具体实施方式中，采用的提取温度为65℃，乙醇体积分数为55％。

进一步地，步骤(2)中，所述苯乙烯型大孔吸附树脂为HPD-100、HPD-826、HPD-600或D101。

更进一步地，步骤(2)中，所述苯乙烯型大孔吸附树脂为D101。

进一步地，步骤(2)中，洗脱用乙醇体积分数为80％。

在考虑到生产成本和效率的情况下，步骤(2)中，选择使用动态吸附的方式，大孔吸附树脂的上样量在4BV(柱体积)以下，优选4BV；进一步地，上样液室温下吸附40～60min。

本发明还提供了上述沙棘总黄酮在制备一氧化氮合酶抑制剂或血管内皮生长因子抑制剂中的用途；所述一氧化氮合酶是诱导型一氧化氮合酶或/和内皮型一氧化氮合酶。

本发明中所述“除去乙醇”，是指尽可能地除去提取液或洗脱液中的乙醇，其中也包括了有少量乙醇残留的情况。

本发明提供的沙棘黄酮类提取物中黄酮含量(或纯度)显著高于市售规格，为沙棘黄酮的进一步研究提供了有利条件；同时也为以沙棘黄酮作为活性成分的保健品或药品提供了纯度更高的提取物原料。

本发明沙棘黄酮类提取物的制备方法，仅仅使用了较为常见的醇提、大孔树脂纯化，没有碱提酸沉或超临界萃取等复杂的提取工艺，也没有在大孔树脂纯化后再涉入进一步地的纯化手段，这看似常规的技术手段，却能够在较短的时间内，在特定的提取、纯化条件配合下，制备得到极高纯度(80％w/w以上，甚至可以达到90～94％)的沙棘黄酮类提取物，取得了令人意想不到的效果。同时，本发明方法可以避免碱提酸沉中酸、碱可能带来的开环、闭环或水解反应，也可以避免超临界萃取的高成本，为高纯度沙棘黄酮的制备提供了一种低成本且不易改变原黄酮成分结构的新方法。