[发明专利]尿液中游离甲氧基肾上腺素类物质的检测方法

权利要求书

1.一种尿液中游离甲氧基肾上腺素类物质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

所述游离甲氧基肾上腺素类物质包括甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素和3-甲氧酪胺；

样品前处理：在尿液样品中加入混合内标溶液，经过固相萃取得洗脱液，吹干，加入复溶液，得待测样品；

所述混合内标溶液为含有甲氧基肾上腺素内标物、甲氧基去甲肾上腺素内标物和3-甲氧酪胺内标物的甲酸水溶液；

采用液相色谱串联质谱仪对所述待测样品进行检测：

液相色谱条件为：采用反相Agilent Pursuit PFP色谱柱；流动相：A相为甲酸含量为0.1-0.3wt%的水溶液，B相为甲酸含量为0.1-0.3wt%的甲醇溶液，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱的方式为：

0-1.00min，流动相中A相与B相的体积比为95:5；

1.00-2.50min，流动相中A相与B相的体积比由95:5变化至40:60；

2.50-5.50min，流动相中A相与B相的体积比为40:60；

5.51-6.50min，流动相中A相与B相的体积比为5:95；

6.51-8.00min，流动相中A相与B相的体积比为95:5；

所述流动相的流速为：0.2-0.5mL/min；

柱温为28-32℃；

质谱条件为：

正离子模式，扫描方式为多反应监测离子扫描；

其中多反应检测离子扫描的参数包括：

甲氧基肾上腺素定量离子对为180.0/148.1；

甲氧基肾上腺素定性离子对为180.0/165.1；

甲氧基肾上腺素内标物离子对为183.1/168.0；

甲氧基去甲肾上腺素定量离子对为166.1/134.1；

甲氧基去甲肾上腺素定性离子对为166.1/149.1；

甲氧基去甲肾上腺素内标物离子对为169.1/137.1；

3-甲氧酪胺定量离子对为151.0/91.2；

3-甲氧酪胺定性离子对为151.0/119.2；

3-甲氧酪胺内标物离子对为155.1/95.0；

载气为氮气，碰撞气为氩气，锥孔气流速为143-148L/Hr，离子源温度为148-152℃ ，脱溶剂温度为445-455℃ ，脱溶剂气流速为880-920L/Hr，碰撞气流速为0.15-0.17 mL/min。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述质谱条件中：

载气为氮气，碰撞气为氩气，锥孔气流速为145L/Hr，离子源温度为150°C，脱溶剂温度为450°C，脱溶剂气流速为900L/Hr，碰撞气流速为0.16mL/min。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述甲氧基肾上腺素内标物为d3-甲氧基肾上腺素，所述甲氧基去甲肾上腺素内标物为d3-甲氧基去甲肾上腺素，所述3-甲氧酪胺内标物为d4-3-甲氧酪胺。

4.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述混合内标溶液为含有甲氧基肾上腺素内标物、甲氧基去甲肾上腺素内标物和3-甲氧酪胺内标物的0.1-0.3wt%甲酸水溶液，其中甲氧基肾上腺素内标物、甲氧基去甲肾上腺素内标物和3-甲氧酪胺内标物的浓度分别为：d3-甲氧基肾上腺素浓度为 200-250μg/L ；d3-甲氧基去甲肾上腺素浓度为150-200 μg/L；d4-3-甲氧酪胺浓度为50-100 μg/L。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述混合内标溶液为含有甲氧基肾上腺素内标物、甲氧基去甲肾上腺素内标物和3-甲氧酪胺内标物的0.1wt%甲酸水溶液，其中甲氧基肾上腺素内标物、甲氧基去甲肾上腺素内标物和3-甲氧酪胺内标物的浓度分别为：d3-甲氧基肾上腺素浓度为 200μg/L ；d3-甲氧基去甲肾上腺素浓度为150μg/L；d4-3-甲氧酪胺浓度为50μg/L。

6.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述混合内标溶液与所述尿液样品的体积比为0.9-1.1：1；所述尿液样品与所述复溶液的体积比为1：0.9-1.1；所述复溶液为0.1-0.3wt%甲酸水溶液。