[发明专利]一种子宫内膜干细胞制剂及其应用

说明书

技术领域

本发明属于再生医学和生物学技术领域，具体涉及一种子宫内膜干细胞制剂及其应用。

背景技术

近年来，临床中人工流产、药物流产患者人数逐年增加，短期内多次人工流产容易造成子宫内膜的损伤，使得子宫内膜生长异样和宫腔粘连，增加了子宫内膜继发性炎症的风险，使得继发性不孕症的风险显著增高。目前，应用于瘢痕子宫修复的干细胞制剂主要有自体骨髓干细胞制剂和自体脂肪干细胞制剂，其干细胞来源均需要通过创口进行样品采集，不仅取样困难，而且容易给患者造成一定的身体损伤。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种子宫内膜干细胞制剂，应用于制备瘢痕子宫药物，干细胞来源方便、无创伤性。

本发明的具体技术方案如下：

本发明提供了一种子宫内膜干细胞制剂，包含：子宫内膜干细胞、人血清白蛋白、白介素10和血管内皮细胞生长因子。

子宫内膜干细胞是一种成体干细胞，具有自我更新、多向分化和高度增殖的潜能，致癌风险低，受伦理学争议少。因此，本领域的相关研究人员认为子宫内膜干细胞可能成为子宫内膜过薄和内膜病变患者进行内膜修复替代治疗手段。鉴于子宫内膜干细胞与子宫内膜生长的密切关系，从体外分离培养子宫内膜干细胞，然后移植到子宫内膜内促进子宫瘢痕修复。

优选的，所述子宫内膜干细胞的细胞浓度为5.0×10⁶～2.0×10⁷个/mL。

优选的，所述人血清白蛋白的体积百分比浓度为1％～10％，优选为5％。

在瘢痕子宫修复过程中需要多种生长因子的参与，然而内源性生长因子往往难以满足需要，因此，适时适量地引入特定的外源性生长因子有助于子宫瘢痕的修复，经过筛选优化，所述外源性生长因子为干细胞生长因子和基质细胞衍生因子。其中，白介素10(IL-10)是一种多细胞源、多功能的细胞因子，调节细胞的生长与分化，参与炎性反应和免疫反应，是目前公认的炎症与免疫抑制因子；血管内皮细胞生长因子(VEGF)是特异性作用于内皮细胞的糖基化细胞有丝分裂素，在增强血管的渗透性、诱导血管发生和血管生成及内皮细胞生长、促进细胞迁移、抑制细胞凋亡等方面发挥作用。

优选的，所述白介素10的浓度为5～30ng/mL。

优选的，所述血管内皮细胞生长因子的浓度为5～30ng/mL。

优选的，所述子宫内膜干细胞制剂还包括：溶媒，所述溶媒为生理盐水。

本发明还提供了一种上述子宫内膜干细胞制剂的制备方法，将子宫内膜干细胞、人血清白蛋白、白介素10、血管内皮细胞生长因子和生理盐水混合，得到所述子宫内膜干细胞制剂。

本发明还提供了上述子宫内膜干细胞制剂或上述制备方法得到的子宫内膜干细胞制剂在制备瘢痕子宫药物中的应用。

与现有技术相比，本发明的子宫内膜干细胞制剂具有以下优点：

1)本发明选用子宫内膜干细胞作为干细胞来源，取材方便，无创伤性，无伦理限制；而且所述子宫内膜干细胞为自体子宫内膜干细胞，可避免免疫排斥，安全可靠；

2)本发明子宫内膜干细胞制剂还包含白介素10和血管内皮细胞生长因子，两者协同作用，提高干细胞转化率，促进瘢痕子宫的修复；

3)本发明制剂选用生理盐水作为溶剂，其渗透压与人体的渗透压一致，可避免损伤子宫组织，低温保存下其生物活性稳定；

4)本发明制剂的制备步骤简单，耗时短，可实现规模化生产。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。

图1为第二代子宫内膜干细胞的显微照片；其中，图1a为第二代子宫内膜干细胞放大40倍的显微照片，图1b为第二代子宫内膜干细胞放大100倍的显微照片；

图2为子宫内膜干细胞的表面抗原特征的鉴定结果；

图3为实施例2得到的干细胞制剂中子宫内膜干细胞活力测定的结果。

具体实施方式

通过选用子宫内膜干细胞替代骨髓干细胞和脂肪细胞作为核心细胞，同时优化制剂中的组成成分，本发明提供了一种子宫内膜干细胞制剂，应用于制备瘢痕子宫药物，干细胞存活率稳定、来源方便、无创伤性，而且制剂的制备时间短、效率高。