[发明专利]一种全营养水溶微生物多肽菌肥及其生产方法在审
申请号: | 201710307832.1 | 申请日: | 2017-05-04 |
公开(公告)号: | CN107099473A | 公开(公告)日: | 2017-08-29 |
发明(设计)人: | 黄忠诚 | 申请(专利权)人: | 中航立兴(北京)科技发展有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/14;C12N1/18;C05G3/00;C05G3/02;C12R1/885;C12R1/865;C12R1/07 |
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地址: | 100070 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 营养 微生物 多肽 菌肥 及其 生产 方法 | ||
1.一种全营养水溶微生物多肽菌肥,其特征在于该菌剂包括哈茨木霉Q2(Trichoderma harzianum)1.2×109cfu/mL、酿酒酵母T6(Saccharomyces cerevisiae)0.3×109cfu/mL、侧孢芽孢杆菌J5(Bacillus laterosporus Laubach efaciens)2.8×108cfu/mL;氨基酸、多肽含量≥5%,氮磷钾含量≥5%,生化黄腐酸≥5%,螯合铜锌铁锰等微量元素含量≥5%;有机质含量≥40%。
2.一种如权利要求1所述的复合微生物菌剂的生产方法,其特征是包含如下步骤:
1).斜面培养:哈茨木霉Q2、酿酒酵母T6、侧孢芽孢杆菌J5,原始菌种无菌条件下分别接种于固体培养基上,哈茨木霉Q2和酿酒酵母T6于30℃条件下培养60-84小时;侧孢芽孢杆菌J5,37℃条件下培养48-60小时;
2).一级种子培养:将步骤1)培养的菌种无菌条件下分别接种于液体培养基,哈茨木霉Q2、酿酒酵母T6于30℃条件下培养60-84小时、侧孢芽孢杆菌J5于37℃条件下培养48-60小时,制得一级种子,结束培养各酿酒酵母、解淀粉芽孢杆菌悬液光密度OD600值均分别达到3.0、2.5;
3).二级种子培养:按液体培养基的体积比为10%的接种量,将一级种子分别接种到70L的发酵罐中,发酵罐内培养液的总体积为100L,25℃-35℃条件下,搅拌速度为120r/-200min,通气量为1:1.5-2.0,哈茨木霉Q2、酿酒酵母T6培养60-84小时,侧孢芽孢杆菌J5培养48-60小时制得二级种子;
4).混合发酵培养:按液体培养基的体积比为10-15%的接种量,将二级种子接种到1吨的发酵罐中,发酵罐内的培养基总体积为700L,进行发酵培养,获得菌剂。
5).后处理:离心喷雾干燥。按照发酵液体积,添加氨基酸多肽2.0%、可溶性淀粉0.5%;进风150℃、尾风60℃、负压15毫米水柱,喷雾干燥制得水溶微生物多肽菌剂。
其中,步骤1)、2)、3)中所用的培养基哈茨木霉Q2、酿酒酵母T6为PDA培养基,侧孢芽孢杆菌J5为LB培养基强化氨基酸螯合微量元素培养基(1%);
其中,步骤4)所用的培养基的配方按质量百分比为:糖蜜10-15%、鱼蛋白胨2-3%、豆饼粉8-10%,余量为水;
发酵培养采用补料分批培养方式,其中补料碳源为:葡萄糖氮源为:鱼蛋白胨、豆饼粉。
发酵培养阶段:起始0~24小时内,间隔通气,保持在有氧条件发酵,通气量1:1.8,搅拌速度150r-200/min,搅拌间隔时间3-5小时,搅拌3-5分钟,温度25℃-35℃。
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