[发明专利]一种合成醇系香气糖苷生物酶及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201710311140.4 申请日: 2017-05-05
公开(公告)号: CN107058257B 公开(公告)日: 2020-12-04
发明(设计)人: 宋传奎;荆婷婷;高婷;张娜;董绪平;宛晓春 申请(专利权)人: 安徽农业大学
主分类号: C12N9/10 分类号: C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70
代理公司: 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 代理人: 董芙蓉
地址: 230036 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 一种 合成 香气 糖苷 生物酶 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种合成醇系香气糖苷生物酶,其特征在于,由CsGT1、CsGT2、CsGT3组成,所述CsGT1的核苷酸如SEQ ID NO:1所示,氨基酸如SEQ ID NO:2所示;所述的CsGT2的核苷酸如SEQ IDNO:3所示,氨基酸如SEQ ID NO:4所示;所述的CsGT3的核苷酸如SEQ ID NO:5所示,氨基酸如SEQ ID NO:6所示。

2.根据权利要求1所述的合成醇系香气糖苷生物酶,其特征在于,所述生物酶的CsGT2、CsGT3反应体系为:缓冲液:Tris-HCl和磷酸缓冲液,PH范围为PH 6.5-8.5,温度为20-45度。

3.根据权利要求2所述的合成醇系香气糖苷生物酶,其特征在于,所述PH范围为7.0-8.5,温度为30-35度。

4.根据权利要求1所述的合成醇系香气糖苷生物酶,其特征在于,所述CsGT1对苯甲醇,苯乙醇,香叶醇,芳樟醇,芳樟醇氧化物,4-羟基香豆素,及顺/反-3-己烯醇均有活性。

5.一种权利要求1所述的合成醇系香气糖苷生物酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:把权利要求1所述的CsGT1、CsGT2、CsGT3的核苷酸序列连接到pGEX-4T1载体中,转入BL21或Rosetta大肠杆菌中37℃培养至OD600=0.6-0.8,添加1mM IPTG后,16-18℃、室温或37℃诱导20-24小时,用GST-树脂进行纯化,纯化后的蛋白用SDS-Page进行检测。

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