[发明专利]一种合成醇系香气糖苷生物酶及其制备方法有效
申请号: | 201710311140.4 | 申请日: | 2017-05-05 |
公开(公告)号: | CN107058257B | 公开(公告)日: | 2020-12-04 |
发明(设计)人: | 宋传奎;荆婷婷;高婷;张娜;董绪平;宛晓春 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
地址: | 230036 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 合成 香气 糖苷 生物酶 及其 制备 方法 | ||
1.一种合成醇系香气糖苷生物酶,其特征在于,由CsGT1、CsGT2、CsGT3组成,所述CsGT1的核苷酸如SEQ ID NO:1所示,氨基酸如SEQ ID NO:2所示;所述的CsGT2的核苷酸如SEQ IDNO:3所示,氨基酸如SEQ ID NO:4所示;所述的CsGT3的核苷酸如SEQ ID NO:5所示,氨基酸如SEQ ID NO:6所示。
2.根据权利要求1所述的合成醇系香气糖苷生物酶,其特征在于,所述生物酶的CsGT2、CsGT3反应体系为:缓冲液:Tris-HCl和磷酸缓冲液,PH范围为PH 6.5-8.5,温度为20-45度。
3.根据权利要求2所述的合成醇系香气糖苷生物酶,其特征在于,所述PH范围为7.0-8.5,温度为30-35度。
4.根据权利要求1所述的合成醇系香气糖苷生物酶,其特征在于,所述CsGT1对苯甲醇,苯乙醇,香叶醇,芳樟醇,芳樟醇氧化物,4-羟基香豆素,及顺/反-3-己烯醇均有活性。
5.一种权利要求1所述的合成醇系香气糖苷生物酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:把权利要求1所述的CsGT1、CsGT2、CsGT3的核苷酸序列连接到pGEX-4T1载体中,转入BL21或Rosetta大肠杆菌中37℃培养至OD600=0.6-0.8,添加1mM IPTG后,16-18℃、室温或37℃诱导20-24小时,用GST-树脂进行纯化,纯化后的蛋白用SDS-Page进行检测。
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