[发明专利]具有荧光发射性质的抗体-药物/探针缀合物及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种具有荧光发射性质的抗体‑药物/探针缀合物，具有式I所示结构。本发明提供的抗体‑药物/探针缀合物具有自报告缀合效率特征，其由双官能度荧光分子桥接抗体与探针/药物分子，所述的双官能度荧光分子本身不具有或者仅具有弱的荧光发射能力，仅当抗体‑探针/药物缀合后荧光分子才具有强的荧光发射，因此能够通过荧光监测的方法原位监控缀合过程，并应用于治疗多肽与抗癌药物的传输。

技术领域

本发明涉及有机桥接分子技术领域，尤其涉及一种具有荧光发射性质的抗体-药物/探针缀合物及其制备方法和应用。

背景技术

多肽、蛋白质、抗体与合成聚合物、药物的共价偶联，增强了其在临床应用过程中的稳定性，延长了循环时间，具备了特异性靶向的能力，提高了治疗效率。多种类型的正交click反应被用来构筑蛋白质/抗体生物偶联物，新的设计原则的引入，如，模块化设计和温和的合成方式，进一步促进了该领域的发展。在某些情况下，治疗负载(蛋白质或药物)从偶联物后期中的释放，可以进一步提高蛋白质的活性和治疗效率。然而，功能化偶联物的偶联和释放过程主要依赖于传统的非原位技术，如，体积排除色谱(SEC)，凝胶电泳和质谱。

另外，抗体定向的光学分子的成像在医学诊断和治疗响应评价中展现出巨大的潜力；也可直接与手术或内窥镜过程结合。用荧光探针标记的靶向抗体可以在体内实时高分辨成像，可用于初期的检测和手术中残留癌症组织的监测。然而，一直有荧光的探针也有本质的缺陷，如背景干扰和低的信噪比。

抗体-药物缀合物能够降低体系毒性和增强偶联药物的治疗效率。在抗体-药物缀合物中连接键的设计至关重要，因为它不仅要求能够为遮蔽药物在体循环提供充足的稳定性，而且在肿瘤细胞内应能快速有效地释放药物。触发性可断裂连接键常被用来连接药物和抗体。然而，目前偶联效率和触发后释放程度的定量大多依赖于非原位技术，如高效液相色谱、凝胶电泳、体积排除色谱以及质谱。目前尚不能实现对抗体-药物缀合物在体外和细胞水平上的释放过程的实时监测。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种具有荧光发射性质的抗体-药物/探针缀合物及其制备方法和应用，能够通过荧光监测的方法原位监控缀合过程，并应用于治疗多肽与抗癌药物的传输。

本发明提供了一种具有荧光发射性质的抗体-药物/探针缀合物，具有式I所示结构：

其中，Ab为抗体，DP为荧光探针或药物分子。

本发明提供了一种具有荧光发射性质的抗体-探针缀合物，具有式Ⅱ所示结构：

其中，Ab为癌胚抗原单抗或赫赛丁。

本发明提供了上述抗体-探针缀合物的制备方法，包括以下步骤：

单克隆抗体、含叠氮基元的荧光探针A与双官能荧光分子B进行Michael反应和点击反应，得到式Ⅱ所示抗体-探针缀合物；

其中，所述单克隆抗体为含巯基的癌胚抗原单抗或赫赛丁。

优选的，通过荧光发射强度原位监控抗体-探针缀合物的缀合效率。

本发明提供了上述抗体-探针缀合物或上述制备方法制备的抗体-探针缀合物作为抗原与醌氧化还原酶反应指示剂的应用。

本发明提供了一种具有荧光发射性质的抗体-药物缀合物，具有式Ⅲ所示结构：

其中，DOX为阿霉素，Ab为癌胚抗原单抗或赫赛丁。

本发明提供了上述抗体-药物缀合物的制备方法，包括以下步骤：